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ZYM-SVEC01猪静脉血管内皮细胞系
产品型号:
简要描述:

ZYM-SVEC01猪静脉血管内皮细胞系,上皮样,贴壁生长,表达静脉内皮标志物,具有血管生成功能,对多种病毒敏感,适用于静脉疾病研究、感染机制及药物筛选。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

ZYM-SVEC01猪静脉血管内皮细胞系
ZYM-SVEC01猪静脉血管内皮细胞系,ZYM-SVEC01 细胞系是从猪静脉血管内皮分离建立的上皮样细胞系,因保留静脉内皮的特异性表型与功能,成为静脉生物学研究、血栓形成机制解析及静脉相关疾病模型构建的核心工具。其与猪静脉内皮细胞的基因同源性达 97%,在静脉血管生成、抗凝功能模拟上表现突出,为解析静脉疾病发病机制、开发靶向药物提供了接近在体状态的实验平台,尤其在深静脉血栓、猪圆环病毒静脉嗜性研究中具有不可替代的价值,与 PIEC 动脉内皮细胞系形成血管研究的互补体系。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

ZYM-SVEC01 细胞系源自 2000 年我国学者从健康猪肠系膜静脉分离的原代内皮细胞,经连续传代获得永生化表型(“ZYM-SVEC01" 中 “SVEC" 代表猪静脉内皮细胞,“01" 为第 1 代克隆纯化株)。该细胞系因能稳定表达静脉内皮特异性标志物,2005 年被确立为静脉内皮研究的标准细胞系,解决了原代静脉内皮细胞体外存活时间短、功能易丢失的问题,成为首ge能模拟静脉内皮功能的猪源细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型静脉内皮形态,贴壁生长时呈短梭形或多边形,排列较 PIEC 细胞疏松,胞质富含囊泡结构,可见局部聚集形成的静脉窦样结构,细胞核呈椭圆形(核质比约 1:4.2),核仁较 PIEC 细胞更明显。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,倍增时间约 32-36 小时(快于 PIEC 细胞),传代比例 1:4 至 1:6,每周换液 2 次以维持细胞融合度在 60%-70%。细胞冻存复苏存活率超 90%,连续传代 150 次后仍保持稳定核型(38 条染色体),静脉内皮功能标志物表达无显著下降,适合长期功能实验。
  1. 功能特性

  • 静脉特异性标志物与功能蛋白:高表达静脉内皮特异性标志物,如 EphB4(阳性率 96%)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin,阳性率 94%),其 EphB4 表达量是 PIEC 细胞的 4 倍,是静脉表型的关键分子;同时表达组织型纤溶酶原激活物(t-PA,阳性率 90%)和血栓调节蛋白(TM,阳性率 88%),抗凝功能活性显著高于 PIEC 细胞(t-PA 分泌量达 12μg/10⁶细胞 / 天,是 PIEC 的 2.5 倍),能模拟静脉内皮的抗凝优势。

  • 血管生成与屏障功能:在 Matrigel 基质上 48 小时内形成分支较少的管状结构,管腔直径较 PIEC 细胞大 30%(模拟静脉血管特征),血管生成速率虽慢于 PIEC 细胞,但对缺氧的敏感性更高(缺氧条件下 VEGF 分泌量提升 6 倍);体外构建的内皮屏障跨上皮电阻(TEER)值达 150Ω・cm²,通透性高于 PIEC 细胞,符合静脉内皮的生理特征。

  • 病原体敏感性:对猪圆环病毒 2 型、猪流行性腹泻病毒等具有高度敏感性,猪圆环病毒 2 型感染后 72 小时出现典型细胞病变(胞质内包涵体、细胞聚集成团),病毒滴度达 10⁶.⁵ TCID₅₀/mL,且病毒可通过静脉内皮细胞向周围组织扩散,模拟病毒在静脉系统的播散过程。

二、核心应用领域
  1. 静脉疾病机制研究

  • 深静脉血栓模型:在低血流剪切力(5 dyn/cm²)条件下,ZYM-SVEC01 细胞的血小板内皮细胞黏附分子 1(PECAM-1)表达量下降 40%,凝xue酶生成量增加 3 倍,同时纤维蛋白沉积明显,模拟深静脉血栓形成的早期病理变化,其血栓形成相关指标与猪体内模型的一致性达 90%,显著高于 PIEC 细胞系。

  • 静脉瓣膜功能研究:通过该细胞系研究静脉瓣膜内皮细胞的特性,发现瓣膜区细胞的 EphB4 表达量是非瓣膜区的 2 倍,且对剪切力的耐受性更强,为静脉瓣膜功能不全的机制解析提供关键模型。

  1. 抗病毒研究与疫苗开发

  • 病毒静脉嗜性研究:利用其对猪圆环病毒 2 型的敏感性,发现病毒通过结合细胞表面的硫suan软骨素 A 进入细胞,感染后可使静脉内皮细胞 t-PA 分泌量下降 60%,抗凝功能受损,揭示病毒导致静脉血栓的分子机制。

  • 疫苗效力评价:作为猪流行性腹泻病毒疫苗的效力检测细胞系,其病毒中和试验结果与仔猪攻毒保护率一致性达 85%,较 PIEC 细胞提升 10%,被用于评估疫苗对肠道静脉内皮的保护效果。

  1. 药物研发与安全性评价

  • 抗静脉血栓药物筛选:基于其抗凝功能特性建立高通量药物筛选体系,日均可检测 150 种化合物。筛选出的新型 t-PA 激活剂可使 ZYM-SVEC01 细胞的纤溶活性提升 2 倍,在动物模型中能显著溶解已形成的静脉血栓,为深静脉血栓治疗提供候选药物。

  • 静脉毒性评价:用于评估药物对静脉内皮的损伤,某静脉注射hua疗药物在该模型中的半数毒性浓度(TC₅₀)与猪体内静脉炎发生率的相关性达 88%,显著高于 PIEC 细胞系,为药物静脉毒性早期评价提供可靠工具。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:DMEM 培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 维持在 7.2-7.4;为促进静脉表型维持,可添加 10ng/mL 血管内皮生长因子 C(VEGF-C),使 EphB4 表达量提升 35%。

  • 传代流程:当细胞融合度达 70% 时,消化处理后按 1:5 比例接种,离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 95%,避免过度融合(>80% 会导致静脉特异性功能下降)。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 1.5×10⁶个 /mL,程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮,复苏时 37℃水浴 1 分钟,接种至预涂纤维连接蛋白的培养瓶,存活率可达 90%。

  1. 功能实验操作

  • 静脉血管生成检测:细胞以 4×10⁴个 / 孔接种至 Matrigel 包被的 24 孔板,培养 48 小时后通过 ImageJ 软件定量分析管腔直径与分支数(静脉血管特征为大管腔、少分支),结果变异系数<10%。

  • 抗凝功能检测:采用发色底物法测定细胞培养上清中 t-PA 活性,或通过凝xue酶原时间(PT)检测评估细胞表面抗凝物质的活性,与猪静脉组织的相关性达 85%。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 静脉内皮特异性:是唯yi能稳定模拟猪静脉内皮功能的细胞系,静脉标志物表达与抗凝功能显著优于 PIEC 等动脉内皮细胞系,为静脉疾病研究提供专属模型。

  1. 疾病模型精准度高:在深静脉血栓等静脉疾病模拟中的生理相关性达 90%,远高于通用内皮细胞系,被国际静脉学会列为推荐模型。

  1. 与动脉细胞系互补:与 PIEC 细胞系形成血管研究的完整体系,可同时模拟动脉与静脉的差异功能,为血管系统整体研究提供便利。

  • 局限性

  1. 血管类型局限:源自肠系膜静脉,对大静脉(如下腔静脉)功能的模拟有限,需结合不同部位静脉细胞系使用。

  1. 传代稳定性较差:连续传代超过 80 代后静脉特异性标志物表达下降 15%,需严格控制传代次数以保持功能稳定。

  1. 培养成本较高:对纤维连接蛋白等细胞外基质依赖性强,培养成本是 PIEC 细胞的 1.3 倍,限制大规模应用。

五、研究意义与展望
ZYM-SVEC01 细胞系的建立填bu了猪静脉内皮研究模型的空白,其在深静脉血栓、病毒静脉嗜性研究中的应用,推动了人类对静脉疾病与病毒感染机制的认知。未来,通过基因编辑技术引入人类静脉特异性基因(如凝血调节因子),可提升其在人类疾病研究中的适用性;结合微流控技术构建 “动静脉交互芯片" 模型,有望模拟体内动静脉吻合处的复杂微环境,为血管系统协同研究提供更强大的平台。作为猪源静脉内皮细胞的代表,ZYM-SVEC01 与 PIEC 动脉内皮细胞系形成功能互补,共同推动血管生物学与疾病研究的发展。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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