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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1447IBRS-2猪肾传代细胞系

IBRS-2猪肾传代细胞系
产品型号:BY-1447
简要描述:

IBRS-2猪肾传代细胞系,上皮样,贴壁生长,对猪瘟、口蹄疫等病毒敏感性高,适用于病毒分离、疫苗生产及抗病du药物筛选,应用广泛且稳定性强。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

IBRS-2猪肾传代细胞系
IBRS-2猪肾传代细胞系,IBRS-2 细胞系是从猪肾脏组织分离建立的上皮样传代细胞系,因对猪瘟病毒、口蹄疫病毒等多种猪源病毒具有广谱敏感性,且培养条件简单、传代稳定性强,成为兽医学研究、病毒分离鉴定及疫苗工业化生产的经典模型。其保留了猪肾细胞的天然病毒受体谱,同时具备高效增殖与大规模培养适应性,为猪源病毒学研究、疫苗开发提供了经济可靠的工具,尤其在基层实验室与工业化生产中应用广泛,与 PK-15-KO-MAP3K8 等基因编辑细胞系形成 “基础应用 - 精准研究" 的互补体系。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

IBRS-2 细胞系源自 1962 年英国学者从新生仔猪肾脏皮质分离的原代细胞,经连续传代获得永生化表型(“IBRS" 代表猪肾细胞,“2" 为克隆纯化编号)。该细胞系因对猪瘟病毒的敏感性显著高于同期建立的其他细胞系,1970 年被国际兽疫局(OIE)列为猪瘟诊断的推荐细胞系,解决了早期猪源病毒分离效率低、培养困难的问题,成为首ge实现标准化应用的猪肾传代细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型上皮样形态,贴壁生长时呈多边形,排列紧密呈 “铺路石" 样,胞质均匀,细胞核呈圆形或椭圆形(核质比约 1:3.5),核仁清晰。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,倍增时间约 30-34 小时(快于 PK-15-KO-MAP3K8 细胞),接种密度 1×10⁵个 /mL 时,72 小时密度可达 2×10⁶个 /mL(增殖能力优于多数猪肾细胞系)。细胞冻存复苏存活率超 92%,连续传代 200 次后仍保持稳定核型(38 条染色体),病毒敏感性无显著下降,适合长期规模化应用。
  1. 功能特性

  • 病毒受体广谱表达:高表达多种猪源病毒受体,如口蹄疫病毒受体整合素 αvβ6(阳性率 95%)、猪瘟病毒受体 CD46(阳性率 93%),其受体表达谱覆盖 80% 的常见猪源病毒;与 PK-15-KO-MAP3K8 相比,其天然受体表达未受基因编辑干扰,更接近在体肾脏细胞的病毒识别特性。

  • 病毒复制支持能力:对猪瘟病毒的感染效率达 98%,病毒滴度可达 10⁸ TCID₅₀/mL(与 PK-15-KO-MAP3K8 相当);对口蹄疫病毒的复制效率显著优于其他细胞系,48 小时病毒滴度达 10⁷.⁸ TCID₅₀/mL,且能稳定产生典型空斑,是该病毒空斑实验的金标准细胞系。

  • 代谢与培养适应性:葡萄糖消耗速率达 45mg/L/h(高于 PK-15-KO-MAP3K8),可在低血清(2%)培养基中维持 80% 以上活性,对培养条件波动的耐受性强,适合资源有限的基层实验室使用。

二、核心应用领域
  1. 猪源病毒分离与鉴定

  • 临床样本检测:作为猪瘟病毒分离的shou选细胞系,IBRS-2 从临床组织样本中的病毒分离率达 90%(显著高于原代细胞的 60%),且 3 天内即可观察到典型细胞病变(胞质内颗粒增多、细胞融合),我国基层兽医实验室广泛将其用于猪瘟疫情的快速确诊。

  • 病毒分型研究:利用其对口蹄疫病毒各血清型的广谱敏感性,可通过空斑形态差异区分 O 型与 A 型病毒(O 型空斑直径 2-3mm,A 型 1-2mm),为病毒分型提供直观依据,该方法被 OIE 纳入标准操作程序。

  1. 疫苗生产与质量控制

  • 常规疫苗生产:在猪瘟灭活疫苗生产中,IBRS-2 细胞的病毒产量达 10⁸.² TCID₅₀/mL,单位面积产量是 PK-15-KO-MAP3K8 的 1.2 倍,且生产成本降低 30%(无需基因编辑相关优化);我国年产 80% 的猪瘟疫苗采用该细胞系生产,累计应用超 50 年。

  • 疫苗效力检测:作为口蹄疫疫苗批签发的标准细胞系,其病毒中和试验结果与豚鼠攻毒保护率一致性达 90%,检测成本仅为动物实验的 1/5,且耗时从 21 天缩短至 72 小时,大幅提升疫苗质量控制效率。

  1. 基础病毒学研究

  • 病毒入侵机制解析:通过该细胞系发现口蹄疫病毒通过整合素 αvβ6 介导的内吞作用进入细胞,其入侵效率与受体表达量呈正相关(R²=0.91),该发现为靶向受体的抗病du药物开发提供依据。

  • 抗病du药物初筛:建立基于 IBRS-2 的高通量筛选模型,日均可检测 200 种化合物,某植物提取物在该模型中显示对口蹄疫病毒的抑制率达 85%(EC₅₀=12μg/mL),后续动物实验验证有效,证实其筛选可靠性。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,pH 维持在 7.2-7.4;低成本培养可使用 5% 新生牛血清替代,细胞活性保持 90% 以上,病毒产量下降不超过 10%。

  • 传代流程:当细胞融合度达 80% 时,按 1:5-1:6 比例接种,0.25% yi酶消化 30 秒即可,离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 95%,操作简便性优于 PK-15-KO-MAP3K8。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 1.5×10⁶个 /mL,-80℃冻存可保存 6 个月(存活率>85%),液氮保存可达 5 年以上,复苏后 24 小时即可恢复正常增殖。

  1. 病毒培养与检测操作

  • 猪瘟病毒培养:细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后接种病毒(MOI=0.01),37℃培养 72 小时,通过间接免疫荧光检测 E2 蛋白,阳性率可达 98%,结果变异系数<6%。

  • 口蹄疫病毒空斑实验:细胞单层接种 6 孔板,病毒 10 倍系列稀释后吸附 1 小时,覆盖含 1% 琼脂糖的维持液,48 小时后结晶紫染色计数空斑,空斑形成单位(PFU)检测灵敏度达 10⁰.⁵ PFU/mL。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 应用普适性强:对多种猪源病毒敏感,无需针对特定病毒进行基因改造,适合基层实验室的常规检测与规模化生产,应用范围远超 PK-15-KO-MAP3K8 等特异性模型。

  1. 培养成本低廉:对血清质量要求低,可使用低成本替代血清,传代操作简单,培养成本仅为基因编辑细胞系的 1/3,尤其适合资源有限的机构。

  1. 历史数据丰富:累计应用超 60 年,积累了海量病毒培养与检测的标准化数据,实验结果易与历史数据比对,是兽医学研究的 “基准细胞系"。

  • 局限性

  1. 功能研究深度不足:未经过基因编辑改造,难以精准解析单一基因或通路的功能,需与 PK-15-KO-MAP3K8 等细胞系配合开展机制研究。

  1. 部分病毒敏感性低:对猪圆环病毒的分离率仅 30%(显著低于 PK15-B1 细胞的 95%),需与其他细胞系联合使用以覆盖更多病毒类型。

  1. 悬浮培养适应性差:贴壁依赖性强,难以像 PK16-U 细胞那样实现大规模悬浮培养,疫苗生产的规模化程度受限。

五、研究意义与展望

IBRS-2 细胞系的建立为猪源病毒研究与防控提供了基础性工具,其在猪瘟、口蹄疫等重大疫病防控中的应用,直接推动了我国动物疫苗产业的标准化发展。未来,通过基因编辑技术增强其对低敏感性病毒(如猪圆环病毒)的识别能力,或改造为悬浮适应株,可进一步拓展其应用范围;结合微流控技术构建 “芯片 - IBRS-2" 模型,有望提升病毒检测的灵敏度与自动化程度。作为经典猪肾细胞系的代表,IBRS-2 与 PK-15-KO-MAP3K8 等基因编辑细胞系形成互补,共同支撑猪源病毒学研究从基础应用到精准机制的全链条需求。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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