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CHO/HCH18-M II中国仓鼠卵巢细胞系
CHO/HCH18-M II中国仓鼠卵巢细胞系是经基因工程改造的 CHO 衍生株,通过导入 HCH18-M II 基因构建而成,能稳定表达 HCH18-M II 蛋白,因表达稳定性高、功能特异性强,成为蛋白质功能研究与药物研发的特色模型。其在保留 CHO 细胞易培养、可规模化的优势基础上,赋予了靶向研究 HCH18-M II 蛋白的能力,为解析该蛋白参与的生物通路及相关疾病机制提供了精准工具。
构建背景:HCH18-M II 是一种与细胞信号传导相关的功能蛋白,该细胞系通过载体介导(如含 CMV 启动子的表达质粒)将 HCH18-M II 基因导入 CHO 细胞,经抗性筛选及单克隆纯化获得稳定表达株,“HCH18-M II" 代表其表达的特异性蛋白,确保蛋白表达的均一性与持续性。
形态与增殖:体外培养呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形,排列紧密,形态与亲本 CHO 细胞一致。在 37℃、5% CO₂的培养环境中,增殖稳定,传代周期约 2-3 天,可适应含血清的常规培养基,也能兼容无血清培养体系,高密度培养时细胞活性仍能保持稳定,为大规模实验与生产提供了便利。
表达特征:HCH18-M II 蛋白主要定位于细胞特定区域(如细胞膜或细胞质,依蛋白功能而定),表达量是未修饰 CHO 细胞的 6-10 倍(通过蛋白定量检测),长期传代(>30 代)后表达量波动<15%。该蛋白分子量与天然状态一致,能与特异性抗体结合,且保留其生物学活性,可通过功能实验验证其参与的信号传导或分子互作过程。
HCH18-M II 蛋白功能机制研究
靶向药物筛选与研发
生物通路与疾病关联研究
优势:HCH18-M II 蛋白表达稳定,避免了瞬时表达系统的批次差异,实验重复性好;细胞培养条件简单,可适应多种培养体系,便于实验室操作与规模化应用;功能特异性强,能专一性研究 HCH18-M II 相关通路,减少其他蛋白的干扰;与 CHO 细胞的遗传背景兼容,研究结果可与其他 CHO 衍生模型对比,丰富实验数据维度。
局限性:长期培养需维持特定筛选压力(如抗性药物),否则可能丢失目的基因,增加培养成本;作为异源表达系统,HCH18-M II 蛋白的翻译后修饰可能与人体细胞存在细微差异,影响部分功能研究的外推性;对部分针对人类细胞的特异性药物敏感性较低,应用范围存在一定限制。
培养条件:基础培养基为含适量血清的常规培养基,添加必要的筛选药物以维持目的基因稳定表达,同时加入抑菌成分预防污染。传代时需控制细胞密度,避免过度密集影响蛋白表达,贴壁培养时融合度建议保持在 70%-80%。
功能实验优化:进行蛋白功能检测前,需确认细胞中 HCH18-M II 的表达状态(如通过 Western blot 验证);设置亲本 CHO 细胞作为对照,排除细胞本身特性对实验结果的干扰;根据蛋白功能特点调整实验条件,如检测信号通路时需进行适当的刺激处理,确保能准确反映蛋白的活性变化。
冻存与复苏:冻存时使用含保护剂的冻存液,梯度降温后保存于液氮中,以维持细胞活性;复苏时快速恢复至培养温度,逐步适应培养基环境,传代 1-2 次待细胞状态稳定后再用于实验,保证实验结果的可靠性。
CHO/HCH18-M II 细胞系的建立为 HCH18-M II 蛋白相关研究提供了标准化工具,推动了对该蛋白功能及相关通路的深入理解。在基础研究领域,其助力阐明了 HCH18-M II 在细胞生理过程中的作用机制,为发现新的生物学调控网络提供了线索;在应用领域,其为靶向药物筛选提供了高效模型,加速了相关疾病治疗药物的研发进程。随着研究技术的发展,该细胞系与基因编辑、高通量筛选等技术结合,有望在精准医学与功能基因组学研究中发挥更大作用。
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