293 Cells, low passage人胚肾细胞系
293 Cells, low passage人胚肾细胞系在生命科学研究与生物技术产业中,凭借du特的生物学特性和广泛的应用价值,成为科研人员手中的 “利器"。该细胞系源于 1973 年,由荷兰科学家 Alex van der Eb 从人胚肾组织分离获得,经腺病毒 5 型(Ad5)DNA 片段转化后实现永生化。“low passage" 即低代次,指细胞传代次数较少(通常不超过 20 代),此时细胞保留了更原始的生物学特性,遗传稳定性和功能完整性更高。
从生物学特性来看,293 Cells, low passage 呈现典型的上皮样细胞形态,贴壁生长时细胞间连接紧密,呈多边形或铺路石状。其倍增时间约为 24 - 36 小时,在对数生长期增殖迅速。细胞的核型为亚二倍体,含有 59 - 63 条染色体,整合的腺病毒 E1 基因破坏了 p53 和 Rb 蛋白的抑癌功能,使得细胞获得无限增殖能力。同时,该细胞系具备高效的外源基因表达系统,对多种转染方法(如脂质体转染、电穿孔转染)均有较高的耐受和响应能力,转染效率常超 70% ,这为其在基因表达和蛋白生产方面的应用奠定了基础。
在细胞培养方面,维持低代次是保证细胞性能的关键。常用高糖 DMEM 或 MEM 培养基,添加 10% 胎牛血清和 1% 双抗以提供营养并防止污染,培养环境需严格控制在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱中。传代时,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化细胞,当细胞变圆后及时终止消化,按 1:3 - 1:5 的比例传代。为确保细胞的低代次状态,需建立详细的传代记录,并定期进行支原体检测,防止污染影响细胞特性。
293 Cells, low passage 的应用场景极为广泛。在重组蛋白与疫苗生产领域,它是生产治疗性抗体、细胞因子以及病毒样颗粒疫苗的理想宿主,能够实现大规模悬浮培养,高效分泌具有正确翻译后修饰的蛋白产物。在基因治疗中,该细胞系是慢病毒、腺病毒、腺相关病毒(AAV)等载体的标准包装细胞,可制备高滴度病毒液,用于 CAR - T 细胞治疗和遗传病基因治疗药物的研发。此外,在药物研发与毒性测试、基础生物学研究等方面,它也发挥着重要作用,可构建疾病模型筛选候选药物,或用于探究信号通路和病毒入侵机制等。
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