PC 61小鼠杂交瘤细胞系CD25
PC 61小鼠杂交瘤细胞系CD25由 BALB/c 小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合产生，因能稳定分泌抗 CD25 单克隆抗体，成为免疫研究领域的重要工具。CD25 作为白细胞介素 - 2 受体 α 链，在活化 T 细胞表面高表达，是免疫调节的关键分子，这让该细胞系在免疫机制解析、疾病模型构建等方面ji具价值。
显微镜下，PC 61 细胞呈悬浮生长，形态以圆形或类圆形为主，直径约 12-18 微米，像散落在培养基中的 “免疫侦察兵"。胞质丰富，内含大量粗面内质网和高尔基体，这些是抗体合成与分泌的核心细胞器，电镜下可见密集的抗体分泌颗粒。细胞增殖速度中等，倍增时间约 36-48 小时，当密度达 1×10⁶-2×10⁶个 / 毫升时需传代，按 1:3-1:5 比例接种，连续传代 60 次以上仍能稳定分泌抗体。
培养该细胞需模拟杂交瘤生长环境，基础培养基选 RPMI 1640，其含有的氨基酸和维生素可满足高速代谢需求；添加 10% 热灭活胎牛血清提供生长因子，其中 IL-6 等对维持抗体分泌功能至关重要。培养箱需严格控制在 37℃、5% CO₂，pH 稳定在 7.2-7.4，可通过酚红指示剂监测酸碱变化。细胞对渗透压敏感，换液时新旧培养基温度需一致，避免环境波动影响抗体分泌。
PC 61 细胞分泌的抗 CD25 单克隆抗体特异性ji强，能精准识别小鼠 CD25 分子胞外结构域，解离常数（Kd）约 10⁻⁹M，属高亲和力抗体。该抗体为 IgG1 亚型，可通过 Fc 段与免疫细胞表面 Fc 受体结合，在流式细胞术检测中，能清晰区分活化 T 细胞（CD25⁺）与静息 T 细胞（CD25⁻），荧光强度是背景信号的 10-20 倍，是分选和鉴定活化 T 细胞的可靠试剂。
在免疫调节机制研究中，该细胞系分泌的抗体是解析 CD25 功能的关键。CD25 与 IL-2 结合后激活 JAK-STAT5 等下游信号通路，促进 T 细胞增殖分化。用其抗体阻断 CD25，能显著抑制活化 T 细胞增殖，减少 IL-2、IFN-γ 等细胞因子分泌，这一特性被广泛用于研究 T 细胞耐受与自身免疫的平衡。比如在实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型中，注射该抗体可减少 T 细胞对中枢神经系统的浸润，缓解炎症，为多发性硬化症的免疫干预提供实验依据。
肿瘤免疫研究中，PC 61 抗体可调控调节性 T 细胞（Treg）功能。Treg 细胞高表达 CD25，通过分泌 IL-10 等抑制性细胞因子抑制抗肿瘤免疫。用该抗体清除 Treg 细胞后，荷瘤小鼠肿瘤生长明显减慢，效应 T 细胞浸润和细胞毒性增强 3-5 倍，为肿瘤研究中的 “去抑制" 策略提供直接证据。基于抗 CD25 抗体的联合疗法（如与 PD-1 抑制剂联用）在动物实验中已显示协同抗肿瘤效果，为临床转化奠定基础。
抗体药物开发领域，该细胞系是抗 CD25 抗体人源化的原始模板。克隆其抗体可变区基因，与人类 IgG 恒定区融合，可构建人 - 鼠嵌合抗体，降低临床应用的免疫原性。像抗 CD25 单抗达克珠单抗的研发，就源于类似杂交瘤细胞系的抗体序列，该药物通过阻断 IL-2 信号抑制 T 细胞活化，已用于器官yi植抗排斥治疗。
培养时，细胞对营养要求较高，需避免培养基内毒素过高（<0.1EU/ml），否则会降低抗体亲和力。冻存用含 10% DMSO 的血清冻存液，梯度降温至 - 80℃后转入液氮，复苏存活率超 80%，保障细胞系长期稳定供应。
前沿研究中，其应用不断拓展。单细胞测序助力解析抗体可变区基因突变模式，揭示抗体亲和力成熟机制，为筛选更高亲和力抗 CD25 抗体提供新策略；基因编辑技术改造该细胞系，使其分泌带荧光标签的抗体，可实时追踪与 CD25 的结合动态，为免疫突触形成研究提供可视化工具。
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