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人肺动脉外膜成纤维细胞
产品型号:
简要描述:

人肺动脉外膜成纤维细胞(PAAF)源于血管外膜,呈长梭形贴壁生长。主要作为肺动脉高压、血管重塑及纤维化研究的体外模型,需专用培养基培养,仅供科研使用。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

人肺动脉外膜成纤维细胞

人肺动脉外膜成纤维细胞,是分离自成人肺动脉外膜组织的原代贴壁细胞,是肺组织间质中核心的结构与功能细胞。该细胞经体外分离、纯化及鉴定,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色验证阳性,通过严格无菌检测(无支原体、细菌、真菌及病毒污染),采用早期代次冻存,具备稳定的体外培养特性。作为肺动脉外膜的主要组成细胞,其核心功能是合成与降解细胞外基质(ECM)、维持肺血管结构完整性、参与血管重塑及炎症应答,在肺动脉高压、肺血管损伤修复、纤维化及炎症相关研究中具有关键地位,是探索肺血管病理机制、筛选靶向药物及评估预后的重要细胞模型,适用于免疫印迹、免疫荧光、Transwell、胶原凝胶收缩、ELISA等多种实验技术,广泛应用于临床医学、呼吸病学、药理学等科研领域。

细胞特性

该细胞具有明确的细胞表型及功能特征,核心特性如下:细胞形态典型,呈梭形或纺锤形,为严格贴壁生长,胞体透亮、突起丰富,汇合后呈平行排列的漩涡状或峰状单层,符合成纤维细胞的典型形态特征;细胞特异性表达成纤维细胞特征性标志物波形蛋白(Vimentin),部分活化状态细胞可表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),低表达或不表达上皮及内皮细胞标志物,可特异性区分于其他细胞类型,经免疫荧光、免疫印迹等方法验证,标志物表达稳定;细胞纯度≥90%,无内皮细胞、平滑肌细胞及上皮细胞污染,无支原体、细菌、真菌及病毒污染,细胞活性≥90%,每瓶冻存细胞数≥1×10⁶个,可稳定传代至3-5代,早期代次(P2-P3)功能与形态保持zui'jia佳;细胞具备活跃的细胞外基质合成与代谢能力,可分泌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及弹性蛋白,在炎症因子或机械刺激下可活化并分泌大量促炎及促纤维化因子,是肺血管重塑的核心效应细胞之一;细胞为贴壁依赖性生长,适配常规成纤维细胞培养体系,推荐使用纤维连接蛋白包被以增强贴壁与功能,培养过程中可稳定维持细胞表型与生理功能。

产品特点

本产品具有活性高、纯度高、特异性强、稳定性好、适用性广、操作便捷等核心特点。细胞经严格组织消化、密度梯度离心及差速贴壁法纯化,纯度≥90%,活性≥90%,细胞形态完整、突起清晰,可直接用于实验,无需额外纯化或诱导,降低实验门槛;细胞特异性ji强,精准来源于肺动脉外膜,保留肺血管外膜成纤维细胞te有的表型与功能,能有效模拟肺血管外膜在生理及病理状态下的反应,区别于其他部位成纤维细胞,保障实验的特异性与准确性;细胞生理功能稳定,早期代次冻存,传代过程中细胞形态、增殖能力及基质合成功能无明显衰退,能稳定提供高活性原代细胞模型,保障实验数据的重复性与可靠性;适配常规成纤维细胞培养体系,培养条件温和,操作流程简洁,无需复杂实验设备,适配各类基础及转化医学实验室使用;细胞无支原体、细菌、真菌污染,质检严格,可直接用于后续细胞功能研究、血管重塑实验、药物筛选等各类实验,减少实验污染风险,保障实验顺利进行;适用范围覆盖呼吸病学、药理学、免疫学、临床医学等多个领域,可满足肺血管疾病机制、成纤维细胞功能、基质代谢、药物筛选等多种科研场景需求,同时可用于与肺动脉内皮细胞或平滑肌细胞共培养,构建肺血管壁三维模型,研究细胞间相互作用。

适用范围与样本(细胞)处理

本产品适用于肺血管疾病研究、成纤维细胞功能研究、基质代谢研究、药物筛选与评价、共培养模型构建等场景;可用于肺动脉高压(PAH)、肺血管重塑、肺纤维化等疾病的发病机制研究,探究成纤维细胞的增殖、迁移、凋亡、活化及信号通路调控机制;可用于细胞外基质(胶原蛋白、弹性蛋白)的合成与降解机制研究,探索血管壁硬度及结构维持的分子基础;可用于抗肺纤维化、抗血管重塑及抗炎药物的体外筛选与药效评价,为药物研发提供支撑;可与肺动脉内皮细胞或平滑肌细胞共培养,构建肺血管壁三维模型,研究细胞间相互作用及肺血管重塑的协同机制。(具体培养步骤、细胞维护、实验应用细节请参考产品说明书)
细胞处理与培养需严格遵循无菌操作规范,避免细胞污染;收到细胞后,立即置于37℃水浴锅中快速解冻(1-2分钟,严禁反复冻融),解冻后立即加入预热至37℃的培养基(成纤维细胞专用基础培养基 + 10% 胎牛血清 + 专用生长添加剂)中,轻轻吹打混匀(动作轻柔,避免损伤细胞突起),4℃、300×g 离心5分钟,弃上清液,用培养基重悬细胞后,接种至经纤维连接蛋白包被的培养瓶中,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱中静置培养;培养24小时后更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞及细胞碎片,后续每2-3天更换一次培养液;细胞汇合度达80%-90%时进行传代,传代比例为1:2–1:3,传代时采用温和的细胞分离方式,轻轻吹打瓶底使贴壁细胞脱落,离心后重悬接种,避免损伤细胞;该细胞为原代细胞,建议在P3代前完成核心实验,以保证细胞的基质合成及活化功能稳定;如需收集细胞或上清,可在细胞状态良好时,用PBS漂洗后处理或直接收集培养上清,适配各类实验需求。

储存与注意事项

储存条件
细胞冻存液(含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 成纤维细胞专用基础培养基)需采用程序化降温盒(-1℃/min)缓慢降温,置于-80℃密封保存,长期储存(超过6个月)建议转移至液氮(-196℃)中保存,严禁反复冻融、剧烈震荡,防止细胞破裂、活性丧失及功能衰退;冻存细胞取出后需快速解冻,避免在-20℃~0℃区间停留过久,防止细胞损伤;未接种的冻存细胞需密封保存,做好标记(细胞名称、冻存日期、批次、代次),避免混淆;培养基需置于2~8℃避光密封保存,避免反复冻融,使用前预热至37℃,未用完的培养液需密封存放,建议1周内用完;培养相关试剂(DMSO、包被试剂、生长添加剂等)需按对应要求储存,确保试剂活性,实验相关试剂需按需冷藏或冷冻保存,符合生物制品储存的规范要求。
注意事项
1.  所有细胞操作需严格遵循无菌规范,实验器具需提前高压灭菌处理,接种、换液、传代时更换吸嘴,避免交叉污染,影响细胞活性及功能;细胞培养过程中需保持培养环境稳定,避免温度、CO₂浓度波动,防止细胞脱壁或活性下降,同时避免剧烈震荡,防止细胞突起损伤,契合细胞培养的无菌操作与环境控制要求。
2.  细胞解冻、接种、传代需严格遵循操作规范,避免反复冻融,否则会导致细胞破裂、活性丧失,影响培养效果及功能;解冻时需快速均匀,接种后及时置于培养箱中,避免细胞长时间暴露在室温下;操作过程中动作轻柔,避免吹打过度,防止损伤细胞突起,影响细胞间连接及生理功能,保障细胞活性与功能稳定。
3.  细胞培养过程中需定期观察细胞状态,若出现细胞贴壁不良、脱壁、形态异常(胞体皱缩、折光性差、突起消失)或污染(培养液浑浊、出现絮状物)等情况,需及时处理;培养基需定期更换,避免营养耗尽及代谢废物积累,同时可根据细胞生长状态调整传代比例,确保细胞处于对数生长期,维持功能稳定,契合原代成纤维细胞的培养维护要点,建议定期观察细胞活化状态。
4.  实验操作需严格遵循实验室安全规范,妥善处理废弃细胞、培养液及耗材,操作含DMSO的冻存液时需做好个人防护措施(佩戴手套、口罩、护目镜),避免皮肤接触和吸入;避免细胞接触强氧化剂、重金属离子及蛋白变性物质,防止干扰细胞活性及功能;培养期间可采用无菌检测手段定期监测细胞无菌状态,确保细胞质量符合实验及应用要求,契合生物实验室安全与质量控制规范。

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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。

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