人高分化结肠腺癌细胞系
人高分化结肠腺癌细胞系,是源自人结肠腺癌组织、经体外长期培养建系的稳定细胞株,核心特性是呈现高分化表型,形态与功能更接近正常结肠腺上皮细胞,恶性程度低、生长速度平缓、转移潜能弱,无支原体、细菌、真菌及病毒污染,经多次传代验证,可长期稳定培养。该细胞系保留结肠腺癌的核心病理生理特征,同时具备高分化细胞的典型表型,能模拟体内高分化结肠腺癌的生长、代谢及应答特性,是结肠腺癌发病机制、分化调控、抗肿瘤药物筛选、预后评估及临床诊疗相关研究的核心工具,广泛应用于临床医学、肿瘤学、药理学等科研领域,为高分化结肠腺癌基础研究、药物研发及临床转化提供标准化、高活性的细胞模型,尤其适用于药物小肠吸收评价及转运机制研究相关场景。
细胞特性
该细胞系具有明确的高分化肿瘤细胞特性及稳定生长特征,核心特性如下:细胞形态典型,呈柱状或立方状上皮样,为严格贴壁生长,胞体规整、折光性好,排列紧密呈腺管状,与正常结肠腺上皮细胞形态相似度高,契合高分化细胞“形态接近正常细胞"的核心特点;细胞特异性表达结肠腺癌相关标志物(如CK20、CEA、CA19-9等),同时高表达分化相关蛋白,经免疫荧光、免疫印迹等方法验证,标志物表达稳定,可特异性区分于正常结肠上皮细胞及其他肿瘤细胞,部分细胞系还可表达肠道代谢相关酶系,与小肠上皮细胞功能有一定相似性;细胞纯度≥95%,无杂细胞污染,无支原体、细菌、真菌及病毒污染,细胞活性≥90%,可稳定传代≥40代,传代过程中高分化表型、增殖能力及标志物表达无明显衰退,部分细胞系可稳定维持代谢酶活性约20天;细胞增殖速度平缓,倍增时间较长,培养过程中无需额外诱导即可维持高分化表型,可稳定分泌结肠腺癌相关蛋白及细胞因子,部分细胞系可模拟肠道转运功能,适用于药物吸收相关实验;细胞为贴壁依赖性生长,适配常规肿瘤细胞培养体系,无需特殊包被基质,培养过程中可稳定维持细胞表型与肿瘤相关功能,符合高分化结肠腺癌细胞的核心生长特性。
产品特点
本产品具有活性高、纯度高、特异性强、稳定性好、适用性广、操作便捷等核心特点,同时兼具高分化细胞的独特优势。细胞经严格分离纯化、传代筛选及多指标质检,纯度≥95%,活性≥90%,细胞形态完整、排列规整,可直接用于实验,无需额外纯化或诱导,降低实验门槛;细胞特异性ji强,精准表达结肠腺癌相关标志物及分化相关蛋白,保留高分化结肠腺癌细胞的病理生理特征,恶性程度低、转移潜能弱,可有效模拟体内高分化结肠腺癌的生长状态,同时部分细胞系可模拟肠道上皮细胞功能,保障实验的特异性与准确性,契合高分化结肠腺癌研究及药物吸收评价的核心需求;细胞生理功能稳定,可长期传代培养,高分化表型、增殖能力及标志物表达保持稳定,能稳定提供高活性高分化肿瘤细胞模型,保障实验数据的重复性与可靠性;适配常规肿瘤细胞培养体系,培养条件温和,操作流程简洁,无需复杂实验设备,适配各类生物实验室及肿瘤研究机构使用;细胞无支原体、细菌、真菌污染,质检严格,可直接用于后续肿瘤机制研究、药物筛选、标志物检测、药物转运及代谢研究等各类实验,减少实验污染风险,保障实验顺利进行;适用范围覆盖肿瘤学、药理学、免疫学、临床医学等多个领域,可满足高分化结肠腺癌发病机制、分化调控、耐药机制、抗肿瘤药物筛选及疗效评价、药物肠道吸收与转运机制研究等多种科研场景需求,同时可用于与免疫细胞共培养,评估肿瘤免疫应答及免yi治疗效果,契合肿瘤研究及药物研发的多元化需求。
适用范围与样本(细胞)处理
本产品适用于人高分化结肠腺癌发病机制研究、分化调控机制研究、抗肿瘤药物筛选及疗效评价、结肠腺癌相关标志物检测、肿瘤侵袭转移及耐药机制研究、肿瘤免疫研究、药物肠道吸收与转运机制研究等场景;可用于大规模培养获取细胞及细胞上清,用于结肠腺癌相关蛋白、细胞因子的检测与纯化,同时可用于药物吸收潜力、转运机制及肠道代谢相关研究;可用于免疫荧光、免疫印迹、ELISA、Transwell、划痕实验、跨膜转运实验等多种实验技术,检测结肠腺癌标志物表达、评估细胞增殖、侵袭转移能力、筛选抗肿瘤药物,同时可通过表观渗透系数(Papp)判断药物吸收能力,研究药物转运与代谢机制;可用于体外构建高分化结肠腺癌模型,探究结肠腺癌发生、发展及分化调控的分子机制,部分细胞系可用于模拟体内肠转运实验,为结肠腺癌临床诊疗及药物研发提供理论支撑;可作为工具细胞,用于抗肿瘤药物的筛选、药效评价、作用机制分析,辅助药物研发与质量控制,符合肿瘤药物研发及药物吸收评价的规范要求。(具体培养步骤、细胞维护、实验应用细节请参考产品说明书)
细胞处理与培养需严格遵循无菌操作规范,避免细胞污染;收到细胞后,立即置于37℃水浴锅中快速解冻(1-2分钟,严禁反复冻融),解冻后立即加入预热至37℃的培养基(结肠癌细胞专用基础培养基 + 10% 胎牛血清 + 专用生长添加剂)中,轻轻吹打混匀(动作轻柔,避免损伤细胞),4℃、300×g 离心5分钟,弃上清液,用培养基重悬细胞后,接种至培养瓶中,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱中静置培养;培养24小时后更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞及细胞碎片,后续每2-3天更换一次培养液;细胞密度达到0.6–0.8×10⁶ cells/mL时进行传代(适配高分化细胞平缓增殖的特点),传代比例为1:2–1:3,传代时轻轻吹打瓶底使贴壁细胞脱落,离心后重悬接种,传代过程中可采用温和的细胞分离方式,避免损伤细胞;该细胞可长期传代培养,传代过程中需维持对数生长期,确保高分化表型及增殖能力稳定;如需收集细胞或上清,可在细胞状态良好时,用PBS漂洗后处理或直接收集培养上清,适配各类实验需求,用于药物转运实验时可接种于多孔可渗透聚碳酸酯膜上培养,形成连续单层后进行相关检测。
储存与注意事项
储存条件
细胞冻存液(含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 结肠癌细胞专用基础培养基)需采用程序化降温方式,置于-80℃密封保存,长期储存(超过6个月)建议转移至液氮(-196℃)中保存,严禁反复冻融、剧烈震荡,防止细胞破裂、活性丧失及高分化表型改变;冻存细胞取出后需快速解冻,避免在-20℃~0℃区间停留过久,防止细胞损伤;未接种的冻存细胞需密封保存,做好标记(细胞名称、冻存日期、批次),避免混淆;培养基需置于2~8℃避光密封保存,避免反复冻融,使用前预热至37℃,未用完的培养液需密封存放,建议1周内用完;培养相关试剂(DMSO、Protein G/A层析介质、包被试剂等)需按对应要求储存,确保试剂活性,实验相关试剂需按需冷藏或冷冻保存,用于药物代谢研究的相关试剂需严格控制储存条件,符合生物制品储存的规范要求。
注意事项
1. 所有细胞操作需严格遵循无菌规范,实验器具需提前高压灭菌处理,接种、换液、传代时更换吸嘴,避免交叉污染,影响细胞活性及高分化表型;细胞培养过程中需保持培养环境稳定,避免温度、CO₂浓度波动,防止细胞脱壁或活性下降,同时避免剧烈震荡,防止细胞损伤,契合细胞培养的无菌操作与环境控制要求,尤其用于药物转运实验时,需严格控制培养环境以维持细胞单层完整性。
2. 细胞解冻、接种、传代需严格遵循操作规范,避免反复冻融,否则会导致细胞破裂、活性丧失,影响培养效果及高分化表型;解冻时需快速均匀,接种后及时置于培养箱中,避免细胞长时间暴露在室温下;操作过程中动作轻柔,避免吹打过度,防止损伤细胞,影响增殖及肿瘤相关功能,保障细胞活性与高分化表型稳定,避免因操作不当导致细胞分化状态改变。
3. 细胞培养过程中需定期观察细胞状态,若出现细胞贴壁不良、脱壁、形态异常(胞体皱缩、折光性差、排列紊乱)或污染(培养液浑浊、出现絮状物)等情况,需及时处理;培养基需定期更换,避免营养耗尽及代谢废物积累,同时可根据细胞生长状态调整传代比例(适配高分化细胞平缓增殖特点),确保细胞处于对数生长期,维持高分化表型稳定,契合高分化结肠腺癌细胞的培养维护要点,用于药物代谢实验时,需定期检测细胞代谢酶活性。
4. 实验操作需严格遵循实验室安全规范,妥善处理废弃细胞、培养液及耗材,操作含DMSO的冻存液时需做好个人防护措施(佩戴手套、口罩、护目镜),避免皮肤接触和吸入;避免细胞接触强氧化剂、重金属离子及蛋白变性物质,防止干扰细胞活性及高分化表型,避免影响药物转运及代谢相关实验结果;培养期间可采用无菌检测手段定期监测细胞无菌状态,确保细胞质量符合实验及应用要求,契合生物实验室安全与质量控制规范。
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