RF-88K赤狐肾细胞系
RF-88K赤狐肾细胞系在赤狐肾脏生物学研究领域具有不可替代的重要意义，为深入探究赤狐肾细胞的特性与功能提供了稳定可靠的体外研究工具，助力科研人员系统剖析赤狐肾脏的发育机制、代谢功能及相关病理过程，为该物种的保护与研究奠定了关键基础。
赤狐作为广泛分布于森林、草原、半沙漠等多样环境的犬科动物，其肾脏系统进化出了ji强的环境适应能力。在干旱地区，需高效重吸收水分以维持体内水平衡；在食物盐分波动较大的环境中，又要精准调节电解质代谢，同时完成代谢废物的排泄。肾细胞作为这些功能的核心执行者，其生理特性与赤狐的生存策略紧密相连。以往对赤狐肾脏的研究多局限于整体动物解剖观察，难以在细胞层面解析代谢功能的分子调控网络，而原代肾细胞培养存在存活期短、传代后功能衰减等问题，严重制约了研究深度。RF-88K 细胞系的建立，恰好解决这一研究空白。
RF-88K 赤狐肾细胞系源自健康成年赤狐的肾脏皮质组织，通过原代培养与特异性纯化技术构建而成。建立过程严格遵循无菌操作规范：在超净工作台内获取肾脏组织后，精细剥离肾表面的结缔组织与血管网，选取富含肾小管上皮细胞的皮质区域，将组织切割为 1mm³ 的匀质小块；用含双抗的磷酸盐缓冲液反复冲洗 5-6 次，去除残留血液与杂质；加入含消化酶的专用分散液，在 37℃恒温水浴中消化 40 分钟，期间每 10 分钟轻柔吹打以确保细胞充分分离；经 70μm 滤网过滤去除组织碎屑后，1000r/min 离心 8 分钟收集细胞，用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养液重悬，接种于预包被胶原蛋白的培养瓶中，置于 37℃、5% CO₂培养箱中培养。初期每日更换培养液以淘汰非贴壁细胞，待细胞汇合度达 80% 时采用 0.25% 消化酶 - EDTA 混合液消化传代。目前该细胞系已稳定传代 48 代，经台盼蓝染色检测，细胞活力持续保持在 91% 以上。
该细胞系呈现典型的上皮样形态特征：细胞呈立方形或多边形，胞体饱满，平均边长约 18μm，排列呈单层铺路石样；胞质丰富，可见较多的线粒体与内质网，经吉姆萨染色显示胞质呈淡蓝色；细胞核呈圆形，位于细胞中央，核质比约 1:4，具有稳定的贴壁生长特性。生长动力学研究表明，RF-88K 细胞在 DMEM/F12 培养液中表现最佳，较 MEM 培养液增殖速率提升 27%；最适培养温度为 37℃，偏离 1℃即导致增殖率下降 13%；10% 胎牛血清浓度下群体倍增时间最短，为 65 小时，血清浓度降至 5% 时倍增时间延长至 95 小时。连续传代 30 代后，细胞形态无明显变异，核型分析显示染色体数目稳定为 2n=34，与赤狐体细胞一致，证实其遗传背景稳定。
功能特性研究显示，RF-88K 细胞高表达肾小管上皮细胞特异性标志物：细胞角蛋白 18（CK18）阳性率 97%，水通道蛋白 1（AQP1）表达量显著高于其他细胞系，钠钾 ATP 酶活性达 28μmol Pi/mg protein/h。该细胞具有活跃的物质转运功能，能主动吸收葡萄糖、氨基酸等营养物质，在含不同浓度氯化钠的培养液中可调节自身的离子转运速率，模拟肾小管的重吸收过程。环境适应实验表明，当暴露于高渗环境时，细胞内渗透压调节相关基因 AQP2 的表达量在 8 小时内上调 4.5 倍，尿素转运蛋白 UT-A1 的含量增加 3.8 倍，体现出对干旱环境的快速响应机制。模拟重金属刺激后，解毒相关酶谷胱gan肽 - S - 转移酶活性增强 2.3 倍，金属硫蛋白的分泌量升高 3.1 倍，提示存在活跃的应激防御过程。
在应用价值方面，RF-88K 细胞系已成为多个研究领域的关键工具：在肾脏生理学中，通过 RNA 干扰技术沉默 AQP1 基因后，细胞的水重吸收功能显著下降，证实该蛋白在肾小管水代谢中的核心作用；比较生理学研究发现，与家犬肾细胞相比，RF-88K 细胞的钠钾 ATP 酶基础活性高 2.2 倍，揭示其盐代谢适应的分子基础；在兽医学领域，该细胞系已用于筛选赤狐肾脏疾病治疗药物，发现特定利尿剂在 1μmol/L 浓度时可促进 72% 的钠离子排泄，且对细胞毒性低于部分同类药物。
作为永生化赤狐肾细胞系，RF-88K 不仅为该物种的肾脏生物学研究提供了标准化模型，其环境适应机制研究还可为犬科动物比较生理学提供新视角，在野生动物保护、肾脏疾病模型构建等领域具有重要的科研与应用价值。
以上信息仅供参考，详细信息请联系我们。
详细介绍
产品咨询
联系我们
