ITH48永生化滇西亚种树鼩肝细胞系
ITH48永生化滇西亚种树鼩肝细胞系在树鼩肝脏生物学研究领域有着重要地位，为深入探究滇西亚种树鼩肝细胞的特性与功能提供了可靠的体外研究工具，助力科研人员揭开树鼩肝脏的诸多奥秘。
滇西亚种树鼩作为一种分布于特定区域的小型哺乳动物，其肝脏在物质代谢、解毒以及维持机体稳态等方面发挥着关键作用。肝细胞作为肝脏结构与功能的基本单位，其特性与滇西亚种树鼩的生存和健康紧密相关。以往对树鼩肝脏的研究多依赖整体动物实验，难以在细胞层面精准解析肝脏的生理与病理机制。原代肝细胞培养存在存活时间短、功能不稳定、传代困难等问题，限制了相关研究的深入开展。因此，ITH48 永生化滇西亚种树鼩肝细胞系的建立，为突破这些研究瓶颈带来了新的可能。
ITH48 永生化滇西亚种树鼩肝细胞系来源于滇西亚种树鼩的肝脏组织，通过特定的永生化技术处理后建立而成。建立过程严格遵循细胞培养规范，在无菌条件下获取滇西亚种树鼩的肝脏组织，仔细去除结缔组织和血管，将肝脏组zhi剪切成约 1mm³ 的小块。随后，用含双抗的磷酸盐缓冲液多次冲洗，以彻di清除血液和杂质。接着，加入专用肝细胞分散液，在 37℃的环境中处理 25-35 分钟，期间每隔 8 分钟轻柔吹打，促使细胞充分分散。收集细胞悬液后，经 70μm 细胞滤网过滤，再以 1000r/min 的转速离心 8 分钟，弃去上清液，用含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培养液重悬细胞，并接种于培养瓶中，放置在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱内进行原代培养。在培养初期，每 24 小时更换培养液以去除非贴壁细胞，当细胞汇合度达到 80% 左右时进行传代操作。目前，该细胞系已稳定传代至 50 代以上，细胞活力始终保持在 85% 以上。
该细胞系呈现典型的上皮样形态，细胞呈多边形，胞体饱满，排列紧密呈铺路石样，胞质丰富，细胞核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，具有较强的贴壁生长特性。在生长特性方面，研究发现 ITH48 细胞在 DMEM 培养液中生长状态最为理想，相较于其他培养液，其细胞增殖速度提高约 20%。最适宜的培养温度为 37℃，与多数哺乳动物体温一致；当胎牛血清浓度为 10% 时，细胞群体倍增时间最短，约为 55 小时。历经 40 代传代后，细胞形态和增殖速率未出现明显变化，核型分析显示其染色体数目稳定，维持滇西亚种树鼩正常的染色体数目，遗传背景可靠，稳定保留了肝细胞的固有特性。
在功能特性方面，免疫荧光检测清晰显示，ITH48 细胞高表达肝细胞特异性标志物，如白蛋白、细胞角蛋白 18，确凿证实了其肝细胞属性。该细胞系具备较强的代谢功能，能参与多种物质的合成与分解，对葡萄糖、脂肪等的代谢能力稳定，在维持机体的能量平衡中发挥着重要作用。当 ITH48 细胞受到化学毒物刺激时，解毒相关基因如 CYP450 的表达量显著上调，展现出良好的应激反应能力，为研究滇西亚种树鼩肝脏的解毒机制提供了关键线索。此外，该细胞系对常见的肝脏病原体表现出敏感性，感染后细胞活力下降，炎症因子分泌增加，为深入探究病原体与肝细胞的相互作用机制提供了良好的实验材料。
ITH48 永生化滇西亚种树鼩肝细胞系在多个研究领域展现出广泛的应用价值。在肝脏发育研究中，通过对该细胞系进行基因编辑实验，成功揭示了相关基因在滇西亚种树鼩肝细胞分化过程中的关键调控作用。在比较生理学研究方面，借助该细胞系与其他动物肝细胞系的对比分析，清晰阐明了不同动物肝脏功能的差异及其调控机制。在医学研究领域，基于该细胞系建立的药物筛选模型，已用于评估多种药物对肝脏细胞的影响，为肝脏疾病的防治提供了有力支持。
作为稳定可靠的滇西亚种树鼩肝细胞模型，ITH48 不仅为树鼩肝脏生物学研究提供了重要的技术支撑，推动了相关学术研究的深入发展，还有助于提升对滇西亚种树鼩的研究水平，为该物种的保护和相关领域的研究贡献重要力量。
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