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人白介素8试剂盒技术原理全解析

更新时间:2025-05-26      点击次数:188
  人白介素8(IL-8)试剂盒主要基于双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)原理,实现对样本中IL-8的定量检测。
  试剂盒采用高亲和力的酶标板,预先包被特异性抗人IL-8抗体作为固相抗体。检测时,将待测样本或标准品加入酶标板孔中,样本中的IL-8会与固相抗体结合。经过孵育后,加入生物素化的抗人IL-8检测抗体,该抗体与结合在固相抗体上的IL-8特异性结合。随后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SA-HRP),生物素与亲和素特异性结合,形成固相抗体-人IL-8-生物素标记抗体-SA-HRP的夹心复合物。
  未结合的物质通过洗涤步骤去除,之后加入显色底物四甲基联苯胺(TMB)。在辣根过氧化物酶的催化下,TMB发生酶促反应,产生蓝色物质。加入终止液后,蓝色转变为黄色。颜色的深浅与样本中IL-8的浓度成正比。
  使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值(OD值),结合预先绘制的标准曲线,根据OD值即可计算出样品中IL-8的浓度。该试剂盒具有高灵敏度和特异性,能够准确检测样本中微量的IL-8,在炎症性疾病、肿瘤研究等领域具有重要的临床应用价值。操作过程中需严格控制实验条件,确保检测结果的准确性和可靠性。

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