RNTEC/HL-035兔正常气管上皮细胞系
RNTEC/HL-035兔正常气管上皮细胞系作为兔源气道研究的核心模型，以其纯正的气管上皮细胞特性和稳定的气道屏障功能，在兔气管生理机制解析、气道疾病模型对照及呼吸道药物评价中具有不可替代的地位。与 RNH/HL-034 兔正常肝细胞系的肝脏研究定位不同，该细胞系源自家兔健康气管的黏膜上皮，为探索兔气管的独te生理功能及气道疾病发生机制提供了专属实验载体。
细胞起源与生物学特性
该细胞系源自 SPF 级健康家兔的气管中段黏膜组织，通过yi酶 - EDTA 联合消化法获得原代细胞后，经气管上皮特异性标志物细胞角蛋白 13（CK13）免疫磁珠分选纯化建立。其核心特征是高纯度保留气管上皮细胞的功能表型：CK13 阳性率达 95%，黏液蛋白 MUC5AC 表达率 93%，而平滑肌标志物 α-SMA 阳性率低于 1%，细胞纯度较传统组织块培养法提升 56%。
细胞形态呈现典型的假复层柱状上皮样，胞体高度约 28-32μm，细胞核呈椭圆形（核质比约 1:4.0），可见纤毛结构（约 30% 细胞带有纤毛），与体内气管上皮的形态吻合度达 90%。培养体系需严格控制：含 10% 胎牛血清的 BEGM 培养基（添加 5ng/mL 表皮生长因子和 0.1μmol/L 视huang酸），在 37℃、5% CO₂环境下贴壁生长，倍增时间约 48-52 小时（短于 RNH/HL-034）。传代需在细胞融合度达 70%-80% 时进行，采用 1:2 比例接种，过度密集会导致纤毛脱落（纤毛保有率下降 45%）。
功能验证显示，该细胞系保留关键气管功能：纤毛摆动频率达 12-15 次 / 秒，黏液分泌速率为 8μg/(10⁶细胞・24h)，连续传代 18 次后仍保持核型稳定（44 条染色体，无异常核型），无支原体及兔源病原体污染。
核心应用领域
兔气管生理功能研究
RNTEC/HL-035 细胞系是解析兔气管te有防御功能的理想模型。在气道黏液 - 纤毛清除系统研究中，该细胞系表现出典型的兔种特异性：黏液层厚度达 8μm，是小鼠气管上皮细胞系的 2.1 倍，且对兔源防御素 NP-1 的响应性显著高于其他物种（差异达 3.2 倍）。通过该模型发现，兔气管上皮细胞中独te的氯离子分泌机制（受 CFTR 和 Ca²⁺激活通道协同调控），为理解兔气道湿润机制提供了直接证据。
兔气道疾病研究的阴性对照
在兔哮喘模型中，该细胞系作为正常对照的价值尤为突出。对比 RNTEC/HL-035 与哮喘模型细胞系发现，后者的 IL-8 分泌量是正常细胞的 6.8 倍，黏蛋白 MUC5AC 表达增加 5.3 倍，而 RNH/HL-034 因器官特异性差异，wan全无法作为气道研究的对照。在气管损伤修复研究中，该细胞系可清晰反映正常与损伤细胞的差异：损伤模型细胞的迁移速率是其 2.7 倍，而 RNH/HL-034 的迁移能力仅为其 1/5，不适合作为对照基准。
呼吸道药物的特异性评价
该细胞系为兔用呼吸道药物的安全性与有效性测试提供了专属平台。在兔专用止咳药的评价中，RNTEC/HL-035 细胞系的纤毛摆动恢复率与家兔体内气道功能改善的相关性达 0.90，显著高于人源气管上皮细胞系（0.65）。某新型兔用支气管扩张剂测试显示，当浓度为 10μmol/L 时，该细胞系的环磷suan腺苷（cAMP）水平上升 3.2 倍，平滑肌舒张相关基因表达增加 2.8 倍，提示其潜在治疗效果，为临床剂量设计提供了关键参考。
与 RNH/HL-034 细胞系的差异及协同
两者虽同属兔正常细胞系，但功能定位截然不同：RNTEC/HL-035 专注于气管的屏障防御与黏液分泌功能研究，而 RNH/HL-034 聚焦肝脏代谢与解毒功能；在兔全身性呼吸道感染研究中（如兔巴氏杆菌感染），两者可分别模拟气管炎症和肝脏损伤的病理过程，形成跨器官的疾病模型体系。
优势与局限性
优势体现在：高度模拟兔气管上皮的体内功能特性，尤其适合兔特异性气道研究；作为标准化正常对照，实验数据重复性优于原代气管上皮细胞（CV 值＜7%）；对兔源呼吸道病原体的敏感性更接近在体状态。局限性包括：纤毛功能维持时间有限（传代 15 代后纤毛摆动频率下降 30%）；培养条件苛刻（需添加高价视huang酸）；对非呼吸道病毒的敏感性低（如兔出血症病毒感染率仅为肝细胞系的 8%）。
研究意义与展望
该细胞系的建立填bu了兔正常气管上皮细胞模型的空白，目前已被用于 4 种兔专用呼吸道药物的评价及兔气管冠状病毒的感染机制研究。未来通过气液界面培养技术构建 “假复层气管上皮模型"（目前单层培养的功能模拟度约 60%），有望更精准重现兔气管的三维结构与屏障功能。作为兔气道研究的 “标准工具"，它将推动兔气道疾病模型研究从形态观察向功能解析的深入，为兔用呼吸道药物研发和比较医学研究提供可靠的实验基础。
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