CCC-REPF-1大鼠胚胎成纤维细胞系
CCC-REPF-1大鼠胚胎成纤维细胞系作为源自大鼠胚胎间充质组织的正常成纤维细胞模型，因保留胚胎成纤维细胞的增殖分化潜能及营养支持功能，在胚胎发育调控、组织修复机制及成纤维细胞相关疾病研究中具有重要价值，成为探究胚胎成纤维细胞生理功能及相关生命活动的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠 14-16 天胚胎的躯干间充质组织，经原代培养和纯化获得。细胞形态呈长梭形，胞体大小均匀（长度约 80-120μm，宽度约 15-20μm），胞质呈弱嗜碱性，可见丰富的粗面内质网和高尔基体，约 15% 细胞可见分支状突起，细胞核呈长椭圆形，位于细胞中央，核仁小而清晰。生长方式为贴壁生长，呈平行排列或漩涡状分布，具有接触抑制现象，传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数表现出胚胎成纤维细胞特征：倍增时间约 48 小时，连续传代 25 次后仍保持稳定的生物学特性；表面标志物表达du特，波形蛋白（vimentin）阳性率达 98%，成纤维细胞特异性蛋白 1（FSP1）阳性率 95%，血小板源性生长因子受体 α（PDGFRα）阳性率 92%；具有正常的二倍体核型（染色体数 42 条），无染色体畸变；可分泌 Ⅰ 型和 Ⅲ 型胶原蛋白，基础分泌量分别达 85ng/mL 和 60ng/mL，纤维连接蛋白分泌量达 55ng/mL；具有一定的收缩能力，胶原凝胶收缩率达 40%；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在胚胎发育研究中，CCC-REPF-1 细胞与胚胎干细胞共培养时，可促进胚胎干细胞向中胚层分化，中胚层标志物 Brachyury 表达量增加 4.5 倍，细胞外基质的胶原蛋白网络为胚胎干细胞提供了适宜的微环境，可模拟胚胎发育过程中间充质细胞对干细胞分化的调控作用，为解析胚胎组织形成机制提供理想模型。
组织修复研究方面，该细胞经肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）处理后，迁移速率增加 55%，基质金属蛋白酶 - 2（MMP-2）活性提升 60%，趋化因子 CXCL12 分泌量增加 3.8 倍，可模拟创伤后成纤维细胞向损伤部位聚集的过程，适用于探究胚胎期组织修复的分子机制。
成纤维细胞功能异常研究领域，该细胞经转化生长因子 -β1（TGF-β1）处理后，α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性率提升 50%，胶原蛋白分泌量增加 3 倍，细胞收缩能力增强 65%，能很好地模拟纤维化过程中成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化，为探究瘢痕形成、器官纤维化等疾病的发病机制提供实验基础。此外，该细胞作为饲养层细胞时，可使胚胎干细胞的未分化标志物 Oct4 表达量维持 85% 以上达 15 代，为干细胞培养体系的建立提供支持。
培养与保存规范：推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基，添加 2mM 谷an酰胺、1mM 丙酮酸钠及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次，以维持细胞的高增殖活性。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液，37℃孵育 5-7 分钟，待细胞变圆后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:5-1:8，每 3-4 天传代一次，避免细胞过度密集导致形态改变。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 5×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 88% 以上，2-3 代内可恢复正常的生长和分泌功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物且排列规则后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁更换血清批次，以防影响细胞增殖稳定性。
CCC-REPF-1 大鼠胚胎成纤维细胞系以其稳定的胚胎成纤维细胞特性、强大的增殖能力及多样的生理功能，在胚胎发育研究、组织修复机制探索及干细胞培养支持等领域发挥着重要作用，为揭示成纤维细胞在生命活动中的调控机制和开发相关疾病的治疗策略提供了可靠的细胞模型。
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