人肝窦内皮细胞

检测原理

产品特点

• 纯度高：细胞纯度≥95%，经形态学鉴定、免疫组化染色及微生物检测（细菌、真菌、支原体、病毒），均无杂细胞及微生物污染，可直接用于实验，能有效保证实验结果的准确性和重复性；

• 生物学特性稳定：细胞贴壁性好、增殖能力稳定，原代细胞可传代3-5代，永生化细胞系连续传代15-20代后，仍能保持其典型形态、特异性标志物表达及生理功能，无明显变异，实验重复性强；

• 功能完整性：保留其核心生理功能，可稳定分泌血管活性物质，具有良好的物质转运、血管调控及免疫介导能力，能真实模拟体内的生理功能及病理过程，实验结果具有良好的生理相关性；

• 操作便捷：采用标准化培养体系，解冻后可快速复苏（复苏存活率≥85%），培养条件温和（常规37℃、5% CO₂培养），无需特殊试剂及复杂操作，适合常规实验室培养与操作，降低实验门槛，同时可参考标准化细胞培养流程进行复苏、传代操作；

• 适用性广：可用于多种科研场景，包括肝脏微循环研究、肝脏损伤修复机制探究、肝脏相关疾病（如肝纤维化、肝硬化、肝癌）模型构建、保肝及抗肝纤维化药物筛选、血管生物学研究等，满足不同科研需求，同时可用于细胞共培养、细胞冻存与复苏相关实验等场景。

适用样本类型

• 细胞生物学实验：包括细胞增殖、凋亡、周期、黏附及血管活性物质分泌等基础实验，用于研究其生物学行为及功能特性，可开展细胞消化、传代、冻存等相关操作优化实验；

• 药物筛选与药效评估：用于保肝药物、抗肝纤维化药物、血管活性药物的体外筛选，检测药物对细胞增殖、凋亡及血管活性物质分泌的影响，评估药物疗效，为肝脏相关疾病的药物研发提供支撑；

• 分子生物学实验：用于肝脏相关基因、蛋白（如CD31、vWF、内皮素）表达检测，如RT-PCR、Western blot、免疫组化等实验，探究其在肝病发病、损伤修复中的分子机制，为肝脏相关疾病的诊治研究提供新思路；

• 临床相关研究：用于模拟肝纤维化、肝硬化、肝癌等疾病的细胞模型，为疾病发病机制研究、临床诊断标志物筛选、治疗方案优化提供体外实验支撑，可模拟其在疾病状态下的功能异常及修复过程；

• 其他：可用于细胞共培养（如与肝细胞、肝巨噬细胞共培养）、肝脏微环境构建、细胞冻存与复苏相关实验等科研场景，具体应用可结合实验需求调整，同时可用于验证玻璃化冻存等新型冻存技术对肝窦内皮细胞的影响。

储存与注意事项

（一）储存条件

• 冻存细胞：置于-196℃液氮中长期储存，优先选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存时需使用含20%FBS、10%DMSO的专用冻存液，储存时需确保液氮液位稳定，避免细胞反复冻融（冻融次数≤3次），否则会导致细胞活性下降、死亡或生物学特性改变，冻存后可在半年后复苏检测细胞存活率，确保细胞状态良好，冻存细胞不宜长期存储在-80℃环境中，应尽快转移至液氮罐中；

• 复苏后细胞：复苏后的细胞需立即放入37℃水浴锅中快速晃动融化（时间控制在1分钟内），以1000r/min的速度离心5分钟，去除冻存液中的DMSO后，接种至含wan全培养基的培养瓶中，置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养，24-48小时后更换培养基，去除死细胞，新复苏细胞24小时内避免频繁观察和更换培养基，防止影响细胞贴壁，将培养瓶放入培养箱时，可轻轻旋松瓶盖以保证气体充分交换（若使用透气性瓶盖则无需旋松）；

• 培养基储存：配套wan全培养基需置于4℃冷藏储存，避免高温、强光直射，储存期限不超过1个月，使用前需恢复至室温并轻轻摇匀，解冻血清时需逐步解冻，避免快速变温，防止产生血清沉淀物，血清中出现的纤维蛋白、磷酸钙等沉淀物不影响细胞生长，可通过离心去除，除非必要，避免对血清进行热灭活处理；

• 运输条件：细胞运输采用干冰低温运输（-80℃），运输过程中需做好防震、防潮措施，避免温度波动，运输时间不超过72小时，接收后立即放入对应储存环境，若无法立即储存，可在干冰上暂时保存，避免常温放置过久。

（二）注意事项

• 本产品仅用于科研，严禁用于临床诊断、治疗或其他非科研用途，严禁直接接触人体或用于人体相关实验，实验过程中需严格遵循动物实验相关伦理要求，未预约者不得进行细胞实验；

• 细胞复苏、培养、传代需严格遵循无菌操作原则，实验环境需符合细胞培养要求，实验器具需经紫外灯照射30分钟和通风30分钟后使用，操作前需用75%酒精对器具进行消毒，避免微生物污染；传代时需控制消化时间，当细胞明显变圆、细胞间隙增大并呈现流沙状时停止消化，不同细胞消化时间可根据细胞特性调整，每隔30秒观察一次细胞状态，避免过度消化损伤细胞，贴壁细胞传代前需用5mL PBS轻轻润洗细胞，避免冲击细胞层，润洗后吸去PBS再进行消化操作；

• 细胞培养过程中，需定期观察细胞形态、生长状态，若培养基出现偏紫，多为CO₂溢出导致碱性增加，可轻轻旋松瓶盖放入培养箱校正，变紫培养基可继续使用；若培养液变黄或变浊，可能是细胞密度过高或细菌污染，需及时消化传代或丢弃处理；若发现真菌或霉菌污染，需用紫外灯照射培养箱去除孢子，并进行消毒；

• 处理细胞支原体污染时，建议优先更换新的细胞株，若细胞珍贵，可尝试使用四环素、大环内酯类抗生素等进行治疗，支原体污染易复发，需做好后续监测；

• 细胞换液时机可根据细胞状态调整，传代后隔天或隔两天换液为宜，若死细胞较多可第二天换液，生长速度较慢的细胞可减少换液次数，细胞分布不均时可消化重铺；

• 冻存细胞时，需将细胞悬液以1000-1200r/min离心3-5分钟，丢弃上清液后用预冷的冻存液重悬细胞，细胞密度控制在1×10⁶~1×10⁷个/ml，分装后标记细胞种类、冻存时间及操作人员，放入程序降温盒置于-80℃过夜后，再转移至液氮中长期储存；

• 取出液氮罐中的细胞时，务必加强个人防护，避免冻伤；取材及细胞操作时动作要轻，避免牵拉和挤压造成细胞机械损伤，切忌用水直接冲洗细胞，可用0.1M PBS轻轻冲洗；

• 实验过程中产生的细胞废液、废弃培养基及用过的培养耗材，需经灭菌处理后再丢弃，避免生物污染；操作人员需穿戴无菌手套、口罩、实验服，做好个人防护，实验结束后及时消毒实验台面。

订购信息

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