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人脐静脉细胞融合细胞
产品型号:
简要描述:

人脐静脉细胞融合细胞(EA.hy926)是由人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与A549细胞经PEG融合构建的杂交细胞系。细胞呈上皮样贴壁生长,稳定表达Ⅷ因子相关抗原和Weibel-Palade小体,广泛用于心血管疾病及血管生成研究。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

人脐静脉细胞融合细胞

人脐静脉细胞融合细胞是由人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与目标细胞(如肿瘤细胞、免疫细胞等)经体外诱导融合、筛选并传代培养获得的杂交细胞系,融合了人脐静脉内皮细胞的血管相关特性与目标细胞的特异性功能,是细胞融合机制、血管生物学及相关疾病研究的重要工具。该细胞呈典型融合细胞形态,贴壁生长,部分可呈现铺卵石状与目标细胞形态的融合特征,可稳定表达人脐静脉内皮细胞特异性标志物(如CD31、VIII因子相关抗原)及目标细胞相关标志物,能正常响应细胞增殖、血管生成及细胞融合相关信号通路,可模拟体内细胞融合的生理及病理过程。本产品无杂细胞污染,生物学特性稳定,可在体外长期传代培养,适用于生物医学、肿瘤学、血管生物学及免疫学科研领域,可用于细胞融合机制研究、血管生成调控、肿瘤转移相关研究、药物筛选及临床转化研究等,为相关科研及临床转化提供可靠的体外实验模型,严禁用于临床诊断或治疗用途。

检测原理

本产品的检测与鉴定主要基于细胞形态学观察、免疫细胞化学染色、功能学验证及分子标志物检测四大核心原理,确保细胞纯度、活性及融合特性达标,契合其该细胞的特性及相关研究的应用需求,参考相关细胞融合及人脐静脉内皮细胞鉴定标准:
1.  形态学检测:通过倒置显微镜观察,细胞呈典型融合细胞形态,胞体饱满,大小均匀,贴壁生长,部分呈现人脐静脉内皮细胞te有的铺卵石状排列与目标细胞形态的融合特征,胞质均匀,核仁清晰,可通过形态特征初步鉴别细胞纯度,排除未融合的人脐静脉内皮细胞、目标细胞及成纤维细胞等杂细胞污染,确保细胞形态符合该融合细胞系的典型特征;
2.  免疫细胞化学染色:利用抗原与抗体的特异性结合原理,检测细胞内人脐静脉内皮细胞特异性标志物(CD31、VIII因子相关抗原)及目标细胞相关标志物,其中双标志物阳性表达率≥95%,可有效验证细胞融合特性及身份,排除杂细胞及细菌、真菌、支原体、病毒等微生物污染,同时可辅助检测细胞融合相关蛋白(如syncytin-1、syncytin-2)的表达,为细胞融合机制研究提供基础支撑;
3.  功能学验证:采用CCK-8法检测细胞增殖活性,验证细胞在体外的生长稳定性及传代能力,确保细胞可长期传代且活性稳定;通过血管生成实验验证其内皮细胞相关功能,通过细胞融合效率检测验证其融合特性,契合细胞融合机制及血管生物学研究需求,同时可通过药物干预实验,验证其对相关药物的响应能力,符合药物筛选研究需求;
4.  分子水平验证:通过RT-PCR、Western blot技术检测细胞中人脐静脉内皮细胞标志物基因、目标细胞相关基因及细胞融合相关基因(如EGFR、syncytin-1)的表达水平,结合细胞活性检测,确认细胞的生理功能与遗传稳定性,确保细胞未发生明显变异,可稳定保留融合细胞的核心特性,同时验证其与人脐静脉内皮细胞及目标细胞的遗传关联性,确保细胞功能与该细胞系定位一致。

产品特点

  • 纯度高:细胞纯度≥95%,经形态学鉴定、免疫组化染色及微生物检测(细菌、真菌、支原体、病毒),均无杂细胞及微生物污染,可直接用于实验,能有效保证实验结果的准确性和重复性,契合血管生物学、肿瘤学及免疫学科研的严格要求;

  • 生物学特性稳定:细胞增殖能力强,可连续传代培养,传代过程中形态及融合特性无明显退变,实验重复性强,可稳定表达人脐静脉内皮细胞及目标细胞相关标志物,融合相关基因表达稳定,经多次传代后仍能保持良好的细胞活性及融合功能,符合长期科研实验的需求;

  • 功能完整性:保留融合细胞的核心功能,兼具人脐静脉内皮细胞的血管生成、屏障构建等特性与目标细胞的特异性功能,可正常响应细胞融合相关信号通路,能模拟体内细胞融合的生理及病理过程(如肿瘤细胞与内皮细胞融合介导的转移过程),实验结果具有良好的临床相关性,可用于细胞融合机制及相关疾病发病机制的深入探究;

  • 操作便捷:采用细胞融合细胞专用标准化培养体系,解冻后可快速复苏(复苏存活率≥85%),培养条件温和(常规37℃、5% CO₂培养),无需特殊诱导试剂及复杂操作,适合常规实验室培养与操作,降低实验门槛,可参考标准化人脐静脉内皮细胞及细胞融合细胞培养流程进行复苏、传代及功能学实验操作;

  • 适用性广:可用于多种科研场景,包括细胞融合机制研究、血管生成调控研究、肿瘤转移相关研究、药物筛选与药效评估、EGFR等融合相关基因功能验证等,满足不同科研需求,同时可用于血管化类脑器官构建、细胞共培养等场景,为细胞融合及相关疾病科研及临床转化提供可靠的细胞模型。

适用样本类型

本产品为体外培养的该细胞系,适用于以下科研用实验场景(具体样本处理方法请参考产品说明书):
  • 细胞生物学实验:包括细胞增殖、凋亡、传代及细胞融合相关功能等基础实验,用于研究其生物学行为及融合特性,可开展细胞培养条件优化、细胞融合调控机制、融合相关信号通路等相关实验,同时可用于血清饥饿等条件对细胞周期及融合功能影响的研究;

  • 血管生物学与肿瘤学相关研究:用于血管生成机制探究、肿瘤转移相关研究(如肿瘤细胞与内皮细胞融合介导的转移),可作为体外模型模拟体内细胞融合的病理过程,结合CD31、EGFR等标志物检测,探究细胞融合在疾病发生发展中的分子机制,为血管相关疾病及肿瘤的诊治提供新思路;

  • 分子生物学实验:用于人脐静脉内皮细胞相关基因、目标细胞相关基因及融合相关基因(如EGFR、syncytin-1)的表达检测,如RT-PCR、Western blot、免疫组化等实验,探究细胞融合的分子机制及相关疾病的发病机制,为疾病诊断及治疗靶点筛选提供技术支撑;

  • 药物筛选与药效评估:用于血管相关疾病、肿瘤等相关药物(如抗血管生成药物、细胞融合抑制药物)的体外筛选,检测药物对细胞活性、融合功能及血管生成的影响,评估药物疗效及安全性,为药物研发提供支撑,同时可用于药物对细胞融合相关基因表达的调控研究;

  • 其他:可用于血管化类脑器官构建、细胞共培养、线粒体相关疾病研究(如线粒体基因突变相关疾病的细胞模型构建)等科研场景,具体应用可结合实验需求调整,同时可用于验证新型培养技术对细胞融合特性及功能的影响,建议控制细胞传代次数,避免传代过多导致融合特性改变。

储存与注意事项

(一)储存条件

  • 冻存细胞:置于-196℃液氮中长期储存,优先选择处于对数生长期、融合特性稳定的细胞进行冻存,冻存时需使用细胞融合细胞专用冻存液(含20%FBS、10%DMSO、5%内皮细胞生长因子),储存时需确保液氮液位稳定,避免细胞反复冻融(冻融次数≤3次),否则会导致细胞活性下降、融合特性改变或死亡,冻存后可在半年后复苏检测细胞存活率及融合标志物表达,确保细胞状态良好,冻存细胞不宜长期存储在-80℃环境中,应尽快转移至液氮罐中;

  • 复苏后细胞:复苏后的细胞需立即放入37℃水浴锅中快速晃动融化(时间控制在1分钟内),以800-1000r/min的速度离心5分钟,去除冻存液中的DMSO后,接种至含专用wan全培养基的培养瓶中(可提前用0.5%明胶包被培养瓶,提升贴壁效果),置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,24-48小时后更换培养基,去除死细胞及未贴壁细胞,新复苏细胞24小时内避免频繁观察和更换培养基,防止影响细胞贴壁、增殖及融合特性,将培养瓶放入培养箱时,可轻轻旋松瓶盖以保证气体充分交换(若使用透气性瓶盖则无需旋松);

  • 培养基储存:配套专用wan全培养基需置于4℃冷藏储存,避免高温、强光直射,储存期限不超过1个月,使用前需恢复至室温并轻轻摇匀,解冻血清时需逐步解冻,避免快速变温,防止产生血清沉淀物,血清中出现的纤维蛋白、磷酸钙等沉淀物不影响细胞生长,可通过离心去除,培养基中需添加新鲜内皮细胞生长因子,现配现用,避免生长因子失活,同时可根据细胞融合特性需求,在培养基中添加适量融合调控因子;

  • 运输条件:细胞运输采用干冰低温运输(-80℃),运输过程中需做好防震、防潮措施,避免温度波动,运输时间不超过72小时,接收后立即放入对应储存环境,若无法立即储存,可在干冰上暂时保存,避免常温放置过久,运输过程中需做好细胞标识,防止混淆,运输前可适当调整细胞密度,确保复苏后存活率。

(二)注意事项

  • 本产品仅用于科研,严禁用于临床诊断、治疗或其他非科研用途,严禁直接接触人体或用于人体相关实验,实验过程中需严格遵循人体细胞实验相关伦理要求,未预约者不得进行细胞实验,细胞取材及使用需符合伦理规范;

  • 细胞复苏、培养、传代需严格遵循无菌操作原则,实验环境需符合细胞培养要求,实验器具需经紫外灯照射30分钟和通风30分钟后使用,操作前需用75%酒精对器具进行消毒,避免微生物污染;该细胞系为贴壁生长细胞,传代时可采用0.25%yi酶与0.02%EDTA-Na₂按1:1混合的消化液温和消化,避免过度消化损伤细胞,传代比例建议为1:3-1:5,确保细胞增殖空间,传代过程中需避免细胞聚团过多,可通过轻柔吹打分散细胞;

  • 细胞培养过程中,需定期观察细胞形态、生长状态及融合特性,若培养基出现偏紫,多为CO₂溢出导致碱性增加,可轻轻旋松瓶盖放入培养箱校正,变紫培养基可继续使用;若培养液变黄或变浊,可能是细胞密度过高或细菌污染,需及时传代或丢弃处理;若发现真菌或霉菌污染,需用紫外灯照射培养箱去除孢子,并进行消毒;培养过程中避免剧烈晃动培养瓶,防止细胞脱落影响生长及融合特性,定期检测细胞融合标志物表达,确保细胞功能稳定;

  • 处理细胞支原体污染时,建议优先更换新的细胞株,若细胞珍贵,可尝试使用支原体清除试剂进行治疗,支原体污染易复发,需做好后续监测,支原体污染会影响细胞增殖、融合特性及药物响应性,需严格控制;

  • 细胞换液时机可根据细胞状态调整,复苏后隔天更换一次培养基,后续每2-3天更换一次,换液时动作轻柔,缓慢加入培养基,避免冲击细胞,换液量为培养基总量的1/2-2/3,避免wan全更换培养基导致营养成分骤变,影响细胞增殖及融合特性,换液时可收集上清液用于融合相关蛋白或细胞因子检测;

  • 冻存细胞时,需将细胞悬液以800-1000r/min离心3-5分钟,丢弃上清液后用预冷的细胞融合细胞专用冻存液重悬细胞,细胞密度控制在1×10⁶~1×10⁷个/ml,分装后标记细胞种类、冻存时间及操作人员,放入程序降温盒置于-80℃过夜后,再转移至液氮中长期储存,建立细胞冻存台账,便于追溯,冻存前可检测细胞融合标志物表达,确保冻存细胞功能稳定;

  • 取出液氮罐中的细胞时,务必加强个人防护,避免冻伤;细胞操作时动作要轻,避免剧烈吹打造成细胞机械损伤,切忌用水直接冲洗细胞,可用0.1M PBS轻轻冲洗,避免影响细胞活性及融合特性;

  • 实验过程中产生的细胞废液、废弃培养基及用过的培养耗材,需经灭菌处理后再丢弃,避免生物污染;操作人员需穿戴无菌手套、口罩、实验服,做好个人防护,实验结束后及时消毒实验台面,实验废弃物需按生物安全规范处理,含融合细胞及药物相关废液需单独收集处理,避免交叉污染。

订购信息

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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。


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