大黄鱼EPC细胞

检测原理

产品特点

• 纯度高：细胞纯度≥95%，经形态学鉴定、免疫组化染色及微生物检测（细菌、真菌、支原体、鱼类病毒），均无杂细胞及微生物污染，可直接用于实验，能有效保证实验结果的准确性和重复性，契合水产科研及细胞培养肉研发的严格要求；

• 生物学特性稳定：细胞增殖能力强，可连续传代培养，传代过程中形态及生理功能无明显退变，实验重复性强，可稳定表达上皮细胞特异性标志物，增殖与分化潜能稳定，经多次传代后仍能保持良好的细胞活性，符合长期科研及规模化培养的需求，部分细胞可实现高密度增殖，细胞密度可达6×10⁵cell/mL以上；

• 功能完整性：保留该细胞的核心功能，具有良好的贴壁生长能力和分化潜能，可响应相关信号通路诱导，向肌肉细胞等方向分化，能支持大黄鱼肿大细胞病毒等水产病毒的增殖，可用于细胞培养鱼肉的规模化制备，真实模拟大黄鱼体内细胞的生理特性，实验结果具有良好的应用相关性；

• 操作便捷：采用鱼类细胞专用标准化培养体系，解冻后可快速复苏（复苏存活率≥85%），培养条件温和（常规25-28℃、5% CO₂培养），无需特殊试剂及复杂操作，可适配可食性大孔微载体培养，适合常规实验室培养与操作，同时可满足规模化培养需求，降低实验及研发门槛，可参考标准化鱼类细胞培养流程进行复苏、传代及分化诱导操作；

• 适用性广：可用于多种科研及产业研发场景，包括大黄鱼细胞培养肉制备、肌肉细胞分化机制研究、水产病毒分离与鉴定、水产病害防控药物筛选、基因功能验证及细胞培养技术优化等，满足不同科研及产业需求，同时可用于可食性微载体培养实验、细胞三维培养优化等场景，为大黄鱼相关科研及细胞农业产业发展提供可靠的细胞模型。

适用样本类型

• 细胞生物学实验：包括细胞增殖、凋亡、分化及传代规律等基础实验，用于研究其生物学行为及分化特性，可开展细胞培养条件优化、分化诱导调控、微载体培养适配性等相关实验，同时可用于细胞增殖放大技术研究，为规模化培养提供支撑；

• 细胞培养肉研发：用于大黄鱼细胞培养肉的规模化制备，可作为肌肉细胞、脂肪细胞的增殖载体，通过调控信号通路诱导细胞分化，结合可食性微载体及3D打印技术，构建类似天然大黄鱼肌肉组织的仿真鱼排，契合细胞农业产业研发需求；

• 分子生物学实验：用于鱼类细胞相关基因、蛋白表达检测，如RT-PCR、Western blot、免疫组化等实验，探究大黄鱼细胞增殖、分化及病毒感染的分子机制，为水产病害防控及细胞培养技术优化提供新思路，同时可用于病毒基因组及蛋白质组研究；

• 水产病害与药物研发：用于大黄鱼肿大细胞病毒等水产病毒的分离、鉴定及增殖，可作为水产抗病du药物的体外筛选模型，检测药物对病毒增殖及细胞损伤的抑制作用，为水产病害防控提供技术支撑，同时可用于水产养殖相关药物的安全性评估；

• 其他：可用于鱼类细胞共培养、细胞三维培养体系构建、可食性微载体适配性验证等科研场景，具体应用可结合实验需求调整，同时可用于验证新型培养技术对细胞增殖及分化能力的影响，建议控制细胞传代次数，避免传代过多导致分化潜能下降，可参考低血清培养基配方控制培养成本。

储存与注意事项

（一）储存条件

• 冻存细胞：置于-196℃液氮中长期储存，优先选择处于对数生长期、活性稳定的细胞进行冻存，冻存时需使用鱼类细胞专用冻存液（含20%FBS、10%DMSO、5%鱼类细胞生长因子），储存时需确保液氮液位稳定，避免细胞反复冻融（冻融次数≤3次），否则会导致细胞活性下降、分化潜能降低或死亡，冻存后可在半年后复苏检测细胞存活率，确保细胞状态良好，冻存细胞不宜长期存储在-80℃环境中，应尽快转移至液氮罐中；

• 复苏后细胞：复苏后的细胞需立即放入28℃水浴锅中快速晃动融化（时间控制在1分钟内），以800-1000r/min的速度离心5分钟，去除冻存液中的DMSO后，接种至含该细胞专用wan全培养基的培养瓶中，置于25-28℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养，24-48小时后更换培养基，去除死细胞及未贴壁细胞，新复苏细胞24小时内避免频繁观察和更换培养基，防止影响细胞贴壁及增殖，将培养瓶放入培养箱时，可轻轻旋松瓶盖以保证气体充分交换（若使用透气性瓶盖则无需旋松）；

• 培养基储存：配套该细胞专用wan全培养基需置于4℃冷藏储存，避免高温、强光直射，储存期限不超过1个月，使用前需恢复至室温并轻轻摇匀，解冻血清时需逐步解冻，避免快速变温，防止产生血清沉淀物，血清中出现的纤维蛋白、磷酸钙等沉淀物不影响细胞生长，可通过离心去除，可根据实验需求选用低血清培养基，降低培养成本，培养基中需添加新鲜鱼类细胞生长因子，现配现用，避免生长因子失活；

• 运输条件：细胞运输采用干冰低温运输（-80℃），运输过程中需做好防震、防潮措施，避免温度波动，运输时间不超过72小时，接收后立即放入对应储存环境，若无法立即储存，可在干冰上暂时保存，避免常温放置过久，运输过程中需做好细胞标识，防止混淆，运输前可适当调整细胞密度，确保复苏后存活率。

（二）注意事项

• 本产品仅用于科研及水产、细胞农业相关产业研发，严禁用于临床诊断、治疗或其他非科研用途，严禁直接接触人体或用于人体相关实验，实验过程中需严格遵循动物实验相关伦理要求，未预约者不得进行细胞实验；

• 细胞复苏、培养、传代需严格遵循无菌操作原则，实验环境需符合细胞培养要求，实验器具需经紫外灯照射30分钟和通风30分钟后使用，操作前需用75%酒精对器具进行消毒，避免微生物污染；该细胞为贴壁生长细胞，传代时可采用温和消化方式，避免过度消化损伤细胞，传代比例建议为1:3-1:5，确保细胞增殖空间，传代过程中需避免细胞聚团过多，若用于微载体培养，需控制微载体孔径及细胞接种密度；

• 细胞培养过程中，需定期观察细胞形态、生长状态及增殖情况，若培养基出现异常颜色，多为CO₂溢出或细胞代谢异常导致，可轻轻旋松瓶盖放入培养箱校正，异常颜色培养基可根据细胞状态判断是否继续使用；若培养液变黄或变浊，可能是细胞密度过高或细菌污染，需及时传代或丢弃处理；若发现真菌或霉菌污染，需用紫外灯照射培养箱去除孢子，并进行消毒；培养过程中避免剧烈晃动培养瓶，防止细胞脱落影响生长，若进行三维培养，需控制培养环境的通气量；

• 处理细胞支原体污染时，建议优先更换新的细胞株，若细胞珍贵，可尝试使用支原体清除试剂进行治疗，支原体污染易复发，需做好后续监测，支原体污染会影响细胞增殖、分化及病毒支持能力，需严格控制；

• 细胞换液时机可根据细胞状态调整，复苏后隔天更换一次培养基，后续每2-3天更换一次，换液时动作轻柔，缓慢加入培养基，避免冲击细胞，换液量为培养基总量的1/2-2/3，避免wan全更换培养基导致营养成分骤变，影响细胞增殖及分化，换液时可收集上清液用于细胞代谢产物或病毒滴度检测；

• 冻存细胞时，需将细胞悬液以800-1000r/min离心3-5分钟，丢弃上清液后用预冷的鱼类细胞专用冻存液重悬细胞，细胞密度控制在1×10⁶~1×10⁷个/ml，分装后标记细胞种类、冻存时间及操作人员，放入程序降温盒置于-80℃过夜后，再转移至液氮中长期储存，建立细胞冻存台账，便于追溯，冻存前可检测细胞活性，确保冻存细胞功能稳定；

• 取出液氮罐中的细胞时，务必加强个人防护，避免冻伤；取材及细胞操作时动作要轻，避免牵拉和挤压造成细胞机械损伤，切忌用水直接冲洗细胞，可用0.1M PBS轻轻冲洗，避免影响细胞活性及分化潜能；

• 实验过程中产生的细胞废液、废弃培养基及用过的培养耗材，需经灭菌处理后再丢弃，避免生物污染；操作人员需穿戴无菌手套、口罩、实验服，做好个人防护，实验结束后及时消毒实验台面，实验废弃物需按生物安全规范处理，病毒感染及细胞培养肉研发相关废液需单独收集处理，避免交叉污染。

订购信息

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