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小鼠垂体细胞
产品型号:
简要描述:

小鼠垂体细胞(Mus musculus pituitary cells)是用于内分泌研究的原代或永生化细胞模型。主要类型包括分泌ACTH的AtT-20细胞系及原代培养细胞。贴壁生长,常用于调控激素分泌的机制研究。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

小鼠垂体细胞

小鼠垂体细胞是从健康小鼠垂体组织中分离、纯化并体外培养获得的原代细胞或永生化细胞系,垂体作为机体重要的内分泌中枢器官,其细胞群包含多种功能特异性内分泌细胞,可分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)、催乳素、生长激素、促甲状腺激素、α-促黑素(α-MSH)等多种激素,在调节机体内环境稳态、代谢、个体生长、生殖和泌乳等生理过程中发挥核心作用,同时参与肿瘤免疫调控等相关生理病理过程。本产品保留了该细胞的典型形态特征与内分泌功能,可稳定分泌相关特异性激素,能真实模拟体内垂体细胞的生理代谢及激素分泌调控过程,无杂细胞污染,生物学特性稳定。适用于生物医学科研领域,可用于垂体发育机制研究、内分泌调控研究、激素分泌调控实验、相关疾病模型构建、药物筛选与药效评估、肿瘤免疫相关研究等,为垂体相关疾病的临床诊断与治疗方案优化提供可靠的体外实验模型,严禁用于临床诊断或治疗用途。

检测原理

本产品的检测与鉴定主要基于细胞形态学观察、免疫细胞化学染色、激素分泌检测及分子标志物验证四大核心原理,确保细胞纯度、活性及生物学功能达标:
1.  形态学检测:通过倒置显微镜观察,该细胞形态多样,呈多边形或梭形,贴壁生长,细胞排列均匀,胞质丰富,核仁清晰,可通过形态特征初步鉴别细胞纯度,排除成纤维细胞等杂细胞污染;
2.  免疫细胞化学染色:利用抗原与抗体的特异性结合原理,检测细胞内特异性激素及标志物(如ACTH、催乳素、生长激素、ZBTB20、α-MSH等),阳性表达率≥90%,辅助验证垂体细胞的功能特性,排除杂细胞污染,其中ZBTB20作为调控垂体发育和催乳素产生的关键分子,可作为重要鉴定标志物之一;
3.  激素分泌检测:采用放射免疫测定法或酶联免疫吸附法(ELISA),检测细胞培养上清液中相关激素(如ACTH、催乳素、α-MSH)的分泌量,验证细胞的内分泌功能完整性,确保细胞可正常发挥激素分泌调控作用,符合体外实验需求;
4.  分子水平验证:通过RT-PCR技术检测细胞中激素相关基因及调控分子(如ZBTB20、POMC等)的表达水平,结合细胞活性检测,确认细胞的生理功能与遗传稳定性,确保细胞系未发生明显变异,可用于后续实验研究,其中POMC是编码ACTH、α-MSH合成的关键蛋白,其表达水平可反映垂体细胞的功能状态,而α-MSH相关调控通路还可为肿瘤免疫研究提供支撑。

产品特点

  • 纯度高:细胞纯度≥95%,经形态学鉴定、免疫组化染色及微生物检测(细菌、真菌、支原体、病毒),均无杂细胞及微生物污染,可直接用于实验,能有效保证实验结果的准确性;

  • 生物学特性稳定:细胞贴壁性好、增殖能力稳定,原代细胞可传代3-5代,永生化细胞系连续传代15-20代后,仍能保持垂体细胞的典型形态、激素分泌功能及分子标志物表达,无明显变异,实验重复性强;

  • 功能完整性:严格保留该细胞的内分泌核心功能,可稳定分泌多种特异性激素,对激素释放调控信号(如ACTH释放激素)具有正常应答能力,能真实模拟体内垂体的生理调控过程,实验结果具有良好的生理相关性,同时可稳定表达α-MSH相关通路分子,适配肿瘤免疫相关研究;

  • 操作便捷:采用标准化培养体系,解冻后可快速复苏,培养条件温和(常规37℃、5% CO₂培养),无需特殊试剂及复杂操作,适合常规实验室培养与操作,降低实验门槛,同时可参考标准化细胞培养流程进行复苏、传代操作;

  • 适用性广:可用于多种科研场景,包括垂体发育机制研究、内分泌调控研究、激素分泌实验、垂体相关疾病(如垂体功能低下、库欣病)模型构建、抗肿瘤及内分泌相关药物筛选、垂体-下丘脑轴调控机制研究、肿瘤免疫相关研究等,满足不同科研需求,同时可用于细胞共培养、细胞冻存与复苏相关实验等场景。

适用样本类型

本产品为体外培养的该细胞(原代/永生化细胞系),适用于以下科研用样本/实验场景(具体样本处理方法请参考产品说明书):
  • 细胞生物学实验:包括细胞增殖、凋亡、周期、分化及激素分泌调控等基础实验,用于研究该细胞的生物学行为及功能特性,可开展细胞消化、传代、冻存等相关操作优化实验;

  • 药物筛选与药效评估:用于内分泌类药物、垂体功能调节药物的体外筛选,检测药物对垂体细胞激素分泌、增殖、凋亡的影响,评估药物疗效,也可用于肿瘤免疫相关药物(如MC5R抑制剂)的初步筛选;

  • 分子生物学实验:用于垂体相关基因、蛋白(如ZBTB20、POMC、α-MSH)表达检测,如RT-PCR、Western blot、免疫组化等实验,探究垂体发育、内分泌调控及肿瘤免疫相关的分子机制,为垂体功能障碍相关疾病及肿瘤免yi治疗的诊治研究提供新思路;

  • 临床相关研究:用于模拟垂体相关疾病(如垂体功能低下、库欣病)的细胞模型,为疾病发病机制研究、临床诊断标志物筛选、治疗方案优化提供体外实验支撑,可模拟垂体细胞移植后的功能恢复过程相关研究,同时可用于下丘脑-垂体-骨髓(HPB)轴相关疾病的机制研究;

  • 其他:可用于细胞共培养、垂体-下丘脑轴调控机制研究、细胞冻存与复苏相关实验等科研场景,具体应用可结合实验需求调整,同时可用于验证玻璃化冻存等新型冻存技术对垂体相关细胞的影响,也可用于探究垂体激素对肿瘤免疫的调控作用。

储存与注意事项

(一)储存条件

  • 冻存细胞:置于-196℃液氮中长期储存,优先选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存时需使用含20%FBS、10%DMSO的专用冻存液,储存时需确保液氮液位稳定,避免细胞反复冻融(冻融次数≤3次),否则会导致细胞活性下降、死亡或生物学特性改变,冻存后可在半年后复苏检测细胞存活率,确保细胞状态良好,冻存细胞不宜长期存储在-80℃环境中,应尽快转移至液氮罐中;

  • 复苏后细胞:复苏后的细胞需立即放入37℃水浴锅中快速晃动融化(时间控制在1分钟内),以1000r/min的速度离心5分钟,去除冻存液中的DMSO后,接种至含wan全培养基的培养瓶中,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,24-48小时后更换培养基,去除死细胞,新复苏细胞24小时内避免频繁观察和更换培养基,防止影响细胞贴壁,将培养瓶放入培养箱时,可轻轻旋松瓶盖以保证气体充分交换(若使用透气性瓶盖则无需旋松);

  • 培养基储存:配套wan全培养基需置于4℃冷藏储存,避免高温、强光直射,储存期限不超过1个月,使用前需恢复至室温并轻轻摇匀,解冻血清时需逐步解冻,避免快速变温,防止产生血清沉淀物,血清中出现的纤维蛋白、磷酸钙等沉淀物不影响细胞生长,可通过离心去除,除非必要,避免对血清进行热灭活处理;

  • 运输条件:细胞运输采用干冰低温运输(-80℃),运输过程中需做好防震、防潮措施,避免温度波动,运输时间不超过72小时,接收后立即放入对应储存环境,若无法立即储存,可在干冰上暂时保存,避免常温放置过久。

(二)注意事项

  • 本产品仅用于科研,严禁用于临床诊断、治疗或其他非科研用途,严禁直接接触人体或用于人体相关实验,实验过程中需严格遵循动物实验相关伦理要求,未预约者不得进行细胞实验;

  • 细胞复苏、培养、传代需严格遵循无菌操作原则,实验环境需符合细胞培养要求,实验器具需经紫外灯照射30分钟和通风30分钟后使用,操作前需用75%酒精对器具进行消毒,避免微生物污染;传代时需控制消化时间,当细胞明显变圆、细胞间隙增大并呈现流沙状时停止消化,不同细胞消化时间可根据细胞特性调整,每隔30秒观察一次细胞状态,避免过度消化损伤细胞,贴壁细胞传代前需用5mL PBS轻轻润洗细胞,避免冲击细胞层,润洗后吸去PBS再进行消化操作;

  • 细胞培养过程中,需定期观察细胞形态、生长状态,若培养基出现偏紫,多为CO₂溢出导致碱性增加,可轻轻旋松瓶盖放入培养箱校正,变紫培养基可继续使用;若培养液变黄或变浊,可能是细胞密度过高或细菌污染,需及时消化传代或丢弃处理;若发现真菌或霉菌污染,需用紫外灯照射培养箱去除孢子,并进行彻di消毒;

  • 处理细胞支原体污染时,建议优先更换新的细胞株,若细胞珍贵,可尝试使用四环素、大环内酯类抗生素等进行治疗,支原体污染易复发,需做好后续监测;

  • 细胞换液时机可根据细胞状态调整,传代后隔天或隔两天换液为宜,若死细胞较多可第二天换液,生长速度较慢的细胞可减少换液次数,细胞分布不均时可消化重铺;

  • 冻存细胞时,需将细胞悬液以1000-1200r/min离心3-5分钟,丢弃上清液后用预冷的冻存液重悬细胞,细胞密度控制在1×10⁶~1×10⁷个/ml,分装后标记细胞种类、冻存时间及操作人员,放入程序降温盒置于-80℃过夜后,再转移至液氮中长期储存;

  • 取出液氮罐中的细胞时,务必加强个人防护,避免冻伤;取材及细胞操作时动作要轻,避免牵拉和挤压造成细胞机械损伤,切忌用水直接冲洗细胞,可用0.1M PBS轻轻冲洗;

  • 实验过程中产生的细胞废液、废弃培养基及用过的培养耗材,需经灭菌处理后再丢弃,避免生物污染;操作人员需穿戴无菌手套、口罩、实验服,做好个人防护,实验结束后及时消毒实验台面。

订购信息

如果您对上述产品感兴趣,可通过“联系我们"页面提交需求,我们将及时回复。

以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。


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