人前列腺平滑肌细胞
人前列腺平滑肌细胞,是分离自成人前列腺间质组织的原代贴壁细胞,为前列腺组织中承担收缩功能、结构维持与信号调控的核心细胞组分。该细胞经体外分离、纯化及多重鉴定,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)免疫荧光染色呈阳性,通过严格无菌检测(无支原体、细菌、真菌及病毒污染),采用早期代次冻存,具备稳定的体外培养特性与典型的平滑肌功能。作为前列腺组织的重要间质细胞,其核心功能包括:维持前列腺腺体结构张力、参与前列腺液分泌与排尿功能调控、介导炎症反应及间质重塑,并在良性前列腺增生、前列腺炎、前列腺癌等疾病进程中扮演关键角色。该细胞是探索前列腺疾病机制、筛选靶向药物、研究细胞功能及信号通路的重要体外模型,适配免疫印迹、免疫荧光、Transwell、收缩实验、ELISA、流式细胞术等多种实验技术,广泛应用于泌尿外科学、男科学、药理学等科研领域。
细胞特性
该细胞具有明确的平滑肌细胞表型及功能特征,核心特性如下:细胞形态典型,呈梭形或纺锤形,为严格贴壁生长,胞体饱满、两端突起丰富,排列呈平行束状或漩涡状,汇合后形成连续单层,符合平滑肌细胞的典型形态特征;细胞特异性表达平滑肌细胞特征性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)及Calponin,免疫荧光、免疫印迹检测呈阳性,低表达或不表达上皮细胞标志物(如CK8/18)、内皮细胞标志物(如CD31)及造血细胞标志物(如CD45),可特异性区分于前列腺上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等其他细胞类型;细胞纯度≥90%,无上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞及造血细胞污染,无支原体、细菌、真菌及病毒污染,细胞活性≥90%,每瓶冻存细胞数≥1×10⁶个,可稳定传代至3-5代,早期代次(P2-P3)收缩功能与表型保持zui'jia;细胞具备典型的平滑肌收缩特性,可在组胺、乙酰dan碱、内皮素-1等刺激下发生收缩反应,可合成并分泌细胞外基质(如Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、弹性蛋白)、生长因子(如TGF-β、PDGF)及炎症因子(如IL-6、TNF-α),参与前列腺间质重塑与炎症调控,可响应前列腺微环境中的激素、细胞因子等刺激,参与前列腺疾病相关的信号通路调控;细胞为贴壁依赖性生长,适配常规平滑肌细胞培养体系,推荐使用纤维连接蛋白包被以增强细胞贴壁与收缩功能,培养过程中可稳定维持细胞表型与生理功能。
产品特点
本产品具有活性高、纯度高、特异性强、稳定性好、适用性广、操作便捷等核心特点。细胞经严格组织酶解、密度梯度离心及差速贴壁法纯化,纯度≥90%,活性≥90%,细胞形态完整、突起清晰,可直接用于实验,无需额外纯化或诱导,降低实验门槛;细胞特异性ji强,精准来源于前列腺组织,保留前列腺平滑肌细胞te有的表型与功能,能有效模拟前列腺平滑肌在生理及病理状态下的收缩、分泌及炎症应答,区别于膀胱、子宫等其他器官来源的平滑肌细胞,保障实验的特异性与准确性;细胞生理功能稳定,早期代次冻存,传代过程中细胞形态、增殖能力、收缩功能及标志物表达无明显衰退,能稳定提供高活性原代细胞模型,保障实验数据的重复性与可靠性;适配常规平滑肌细胞培养体系,培养条件温和,操作流程简洁,无需复杂实验设备,适配各类基础及转化医学实验室使用;细胞无支原体、细菌、真菌污染,质检严格,可直接用于后续细胞功能研究、收缩实验、药物筛选、炎症机制研究等各类实验,减少实验污染风险,保障实验顺利进行;适用范围覆盖泌尿外科学、男科学、药理学、免疫学等多个领域,可满足前列腺疾病机制、平滑肌细胞功能、间质重塑、药物筛选及疗效评价等多种科研场景需求,同时可用于与前列腺上皮细胞、前列腺癌细胞共培养,构建前列腺组织微环境模型,研究细胞间相互作用及前列腺疾病发生发展的协同机制。
四适用范围与样本(细胞)处理
本产品适用于前列腺疾病机制研究、平滑肌细胞功能与信号通路研究、药物筛选与评价、共培养与三维模型构建等场景;可用于良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、前列腺癌等疾病的发病机制研究,探究平滑肌细胞增生、凋亡异常、间质与上皮相互作用及相关信号通路调控机制;可用于平滑肌细胞的增殖、迁移、凋亡、收缩及表型转化调控机制研究,探索前列腺功能维持与异常的分子基础;可用于抗前列腺增生、抗炎及抗肿瘤药物的体外筛选与药效评价,特别是针对平滑肌细胞功能调节的药物研发;可与前列腺上皮细胞、前列腺癌细胞共培养,构建前列腺组织微环境模型,研究细胞间相互作用及前列腺疾病发生发展的协同机制,也可构建胶原凝胶三维培养模型,研究平滑肌细胞在三维环境中的收缩、迁移及基质重塑功能。(具体培养步骤、细胞维护、实验应用细节请参考产品说明书)
细胞处理与培养需严格遵循无菌操作规范,避免细胞污染;收到细胞后,立即置于37℃水浴锅中快速解冻(1-2分钟,严禁反复冻融),解冻后立即加入预热至37℃的培养基(平滑肌细胞专用基础培养基 + 10% 胎牛血清 + 专用生长添加剂)中,轻轻吹打混匀(动作轻柔,避免损伤细胞突起),4℃、300×g 离心5分钟,弃上清液,用培养基重悬细胞后,接种至经纤维连接蛋白包被的培养瓶中,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱中静置培养;培养24小时后更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞及细胞碎片,后续每2-3天更换一次培养液;细胞汇合度达80%-90%时进行传代,传代比例为1:2–1:3,传代时采用温和的细胞分离方式,轻轻吹打瓶底使贴壁细胞脱落,离心后重悬接种,避免损伤细胞;该细胞为原代细胞,建议在P3代前完成核心实验,以保证细胞的收缩功能及平滑肌特异性表型稳定;如需进行收缩实验或收集细胞、上清,可在细胞状态良好时,按对应实验方案操作,适配各类实验需求。
储存与注意事项
储存条件
细胞冻存液(含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 平滑肌细胞专用基础培养基)需采用程序化降温盒(-1℃/min)缓慢降温,置于-80℃密封保存,长期储存(超过6个月)建议转移至液氮(-196℃)中保存,严禁反复冻融、剧烈震荡,防止细胞破裂、活性丧失及功能衰退;冻存细胞取出后需快速解冻,避免在-20℃~0℃区间停留过久,防止细胞损伤;未接种的冻存细胞需密封保存,做好标记(细胞名称、冻存日期、批次、代次),避免混淆;培养基需置于2~8℃避光密封保存,避免反复冻融,使用前预热至37℃,未用完的培养液需密封存放,建议1周内用完;培养相关试剂(DMSO、包被试剂、生长添加剂等)需按对应要求储存,确保试剂活性,实验相关试剂需按需冷藏或冷冻保存,符合生物制品储存的规范要求。
注意事项
1. 所有细胞操作需严格遵循无菌规范,实验器具需提前高压灭菌处理,接种、换液、传代时更换吸嘴,避免交叉污染,影响细胞活性、表型及收缩功能;细胞培养过程中需保持培养环境稳定,避免温度、CO₂浓度波动,防止细胞脱壁或活性下降,同时避免剧烈震荡,防止细胞突起损伤,契合细胞培养的无菌操作与环境控制要求。
2. 细胞解冻、接种、传代需严格遵循操作规范,避免反复冻融,否则会导致细胞破裂、活性丧失,影响培养效果及功能;解冻时需快速均匀,接种后及时置于培养箱中,避免细胞长时间暴露在室温下;操作过程中动作轻柔,避免吹打过度,防止损伤细胞突起,影响细胞间连接及收缩功能,保障细胞活性与表型稳定。
3. 细胞培养过程中需定期观察细胞状态,若出现细胞贴壁不良、脱壁、形态异常(胞体皱缩、折光性差、突起消失、形态不规则)或污染(培养液浑浊、出现絮状物)等情况,需及时处理;培养基需定期更换,避免营养耗尽及代谢废物积累,同时可根据细胞生长状态调整传代比例,确保细胞处于对数生长期,维持平滑肌表型及收缩功能稳定,契合原代平滑肌细胞的培养维护要点,建议定期检测细胞表面标志物表达,监测细胞功能。
4. 实验操作需严格遵循实验室安全规范,妥善处理废弃细胞、培养液及耗材,操作含DMSO的冻存液时需做好个人防护措施(佩戴手套、口罩、护目镜),避免皮肤接触和吸入;避免细胞接触强氧化剂、重金属离子及蛋白变性物质,防止干扰细胞活性、表型及收缩功能;培养期间可采用无菌检测手段定期监测细胞无菌状态,确保细胞质量符合实验及应用要求,契合生物实验室安全与质量控制规范;进行收缩实验时,需严格控制刺激条件,确保实验结果的准确性。
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