一、静息表型维持策略
低血清培养条件
采用含0.5%-2%胎牛血清的培养基，可显著抑制细胞活化标志物α-SMA的表达。实验数据显示，与10%血清组相比，低血清组细胞活化率降低60%-70%，且脂滴保留更完整。
维生素A代谢干预
补充视黄醇（10μM）或全反式维甲酸（1μM），可维持细胞内维生素A储存功能。研究证实，视黄醇处理组细胞脂滴数量较未处理组增加40%，且α-SMA表达量下降50%。
细胞外基质模拟
在培养皿表面包被层粘连蛋白（5μg/cm²）或胶原IV（2μg/cm²），可模拟肝脏Disse间隙微环境。此条件下，细胞伸展面积减少30%，突起数量降低50%，更接近静息态形态。
抑制性细胞因子添加
外源性添加HGF（20ng/mL）或BMP-7（50ng/mL），可通过激活Smad7信号通路抑制TGF-β1诱导的活化。联合使用HGF+BMP-7时，活化抑制率可达85%。
二、活化诱导策略
促纤维化因子刺激
TGF-β1（5ng/mL）处理24小时可诱导α-SMA表达量上升10倍，且细胞收缩性增强3倍。PDGF-BB（10ng/mL）则通过促进细胞增殖，使活化细胞数量增加5-8倍。
机械应力模拟
采用柔性基底拉伸系统（10%应变，0.5Hz频率）处理细胞，可激活YAP/TAZ通路，导致α-SMA表达量上升6倍，且细胞排列方向与应力方向一致。
代谢重编程干预
以葡萄糖（25mM）替代培养基中的丙酮酸，可诱导细胞从氧化磷酸化转向糖酵解代谢。此条件下，细胞活化标志物表达量上升3倍，且ECM分泌量增加50%。
三维培养体系构建
使用Matrigel（5mg/mL）或胶原凝胶（2mg/mL）进行三维培养，可模拟体内纤维化微环境。三维培养组细胞活化率较二维培养组高40%，且胶原合成能力增强3倍。
